丙烯酰胺分析方法之1.pptVIP

微生物催化法生产丙烯酰胺的分析方法 一、检测项目及频次 二、气相色谱法简介 三、检测方法 （一）、发酵液及摇瓶的检测 1、总糖的测定 2、氨基氮的测定 3、酶活性的测定 4、生物量PH值电导率测定 （二）、丙烯酰胺的测定 1、丙烯腈、丙烯酸的测定 2、丙烯酰胺浓度的测定 3、PH值和电导率的测定 一、检测项目及频次 二、气相色谱法简介 （一）气相色谱法的特点及应用范围 （二）气相色谱法的简单测定过程 二、气相色谱法简介 （三）气相色谱法的流程图 二、气相色谱法简介 （四）气相色谱的流出曲线特征 二、气相色谱法简介 （五）气相色谱法的定量分析方法 三、常用检测方法 （一）、发酵液及摇瓶的检测 三、常用检测方法 三、常用检测方法 三、常用检测方法 4、生物量、PH值、电导率测定 发酵液倒入10ml试管中于3000r/min离心15分钟后，按离心 管上刻线换算生物量数值。 使用梅特勒S20KPH计测定发酵液的PH值。 使用DDS-11A数显电导率仪进行电导率的测量。 三、常用检测方法 （二）、丙烯酰胺的检测 三、常用检测方法 （二）、丙烯酰胺的检测 * * 目 录 主要特点： 选择性高： 指对性质极为相似的物质有很强的分离能力。 分离效率高： 指能分离沸点很接近和组成极为复杂的混合物。 灵敏度高 ： 指可检测10-11—10-13g的痕量物质。 分析速度快 ：指相对化学分析法而言，完成时间为几分钟 或几十分钟。 不足之处： 不能用来测定未知物。 分析无机物和高沸点有机物比较困难。 气相色谱法操作时使用气相色谱仪，被分析样品 在流速保持一定的惰性气体的带动下进入填充有固定相的色谱柱，在色谱柱中样品被分离成一个个的单一组分，并以一定的先后次序从色谱柱中流出，进入检测器，转变成电信号，再经放大后由记录器记录下来，在记录纸上得到一组曲线图，根据色谱峰的峰高或峰面积就可以定量测定样品中各个组分的含量。这就是气相色谱法的简单测定过程。 二、气相色谱法简介 气相色谱仪是一个载气连续运行、气密的气体流路系统。气相色谱仪的主要设备有载气流速及测量装置，进样器及汽化室色谱柱及温控装置，检测器，数据处理系统。 被分析的样品经气相色谱的分离鉴定后，由数据处理机或色谱工作站绘出各个组分的流出曲线，即色谱图。色谱图以组分的流出时间为横坐标，以检测器对各组分的电讯号响应值为纵坐标。每个峰代表样品中的一个组分。 1、基 线：与横坐标保持平行的直线叫做基线。基线反映了 检测器的电噪音随时间的变化。 2、峰 高：是指由基线至峰顶间的距离，用h表示。 3、峰面积：是指每个组分的流出曲线和基线间所包含的面积 通常由峰高乘以半峰宽（即峰高一半处的峰宽） 用A表示。 　 色谱定量分析的依据是被测物质的量与它在色谱图上的峰面或峰高）成正比。数据处理机或色谱工作站可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。通常情况是采用峰面积进行定量分析。 1、外标法：直接比较法是将未知样品中某一物质的峰面积与该物质的标准品的峰面积直接比较进行定量。通常要求标准品的浓度与被测组分浓度接近，以减小定量误差。 2、内标法：内标法是将已知浓度的标准物质（内标物）加入到未知样品中去，然后比较内标物和被测组分的峰面积，从而确定被测组分的浓度。 　　 1、总糖的测定 ①绘制标准曲线： 分别配50、37.5、25、12.5微克/2毫升葡萄糖标准溶液 ，按操作步进行检测，最终在波长560nm处进行比色，测得其光密度作标准曲线。 ②样品测定操作步骤： 将发酵液离心后，用吸管吸取0.1毫升上清液于50毫升容量瓶，加蒸馏水到刻度，然后吸2毫升于25ml试管中，再加入0.5毫升2.5%苯酚溶液，在冷水浴中冷却，再加 5 毫升浓硫酸，快速摇匀后立即放入沸水中煮沸3分钟，再移入冷水中冷却10分钟，在波长560nm处进行比色，测得其光密度，根据光密度读数在标准曲线上查葡萄糖微克数。 ③计算： 被测样品浓度（微克/毫升）= 被测样品的光密度相应葡萄糖的微克数×稀释倍数 2、氨基氮的测定 ①操作步骤： 吸取发酵液2毫升于150毫升三角瓶中，然后加20毫升蒸馏水 加入