巴西固氮螺菌中杂合双组分蛋白Org35与NifA的相互作用.pdfVIP

农业生物技术学报，2010年，第 18卷，第 2期，第 580—585页 JournalofAgriculturalBiotechnology，2010，Vo1．18，No．2，580—585 研究报告 ALetter 巴西固氮螺菌中杂合双组分蛋白Org35与NifA的相互作用 崔艳华 。 伍丽娴 洪媛媛 陈三凤 -． 1中国农业大学农业生物技术国家重点实验室，北京，100094；2哈尔滨工业大学食品科学与工程学院，哈尔滨，150090 通讯作者，chensf@cau．educn 摘 要 巴西固氮螺菌Azospirillumbrasilense)可以与玉米 口mays)、小麦(Triticumaestivum)等重要作物联 合固氮，是重要的潜在生物肥料。NifA蛋白是所有固氮基因转录所必需的激活蛋白。本研究利用融合蛋 白下 拉分析，探讨了0r 5蛋白与NifA蛋白的相互作用。研究表 明二者存在互作。Or 5蛋白由3个独立结构区 域组成，即PAS结构域、组氨酸蛋 白激酶结构域和应答调节蛋白区域。本研究采用融合蛋白下拉分析了 Org35蛋白三个结构域与NifA的互作关系，结果表明Org35蛋 白与NifA蛋白之间的相互作用是由PAS结 构域介导的。 关键词 巴西固氮螺菌，NifA蛋 白，PAS结构域，杂合双组分蛋白，融合蛋白下拉 TheInteractionbetweenNifAandHybridTwoComponentProteinOrg35 ● ’ ‘ - 一 ’ ’ ‘’ OIAZOSPirillum bra$ilense CuiYanhua 。 W uLixian HongYuanyuan ChenSanfeng 1NationalKeyLaboratoryforAgribiotechnology，ChinaAgriculturalUniversity，Beijing，100094；2SchoolofFoodScienceandEngineering，Harbin InstiutteofTechnology，Hrabin，150090 Correspondingauthor，chensf@cau．edu．ca DOI：1O．3969~．issn．1674—7968．2010．03．026 Abstract AzospiriUum brasilenseisanitrogenfixingbacteriawithrootsofseveralimportantcerealssuchas maize，wheatandrice，andmaybeusedasapotentialbiofertilizer．Ni￡八isacommontranscriptionalactivatorfor thenitrogenfixationgene．TheinteractionbetweenOrg35andNi￡Awasstudiedbymeansoffusionprotein pull—downanalysis．Theresultsindicatedthetwoproteinshaveinteractioneachother．Org35wasconsistedof threedomains，includingPASdomain，histidineproteinkinasedomain(HPK)，andreceivereceptordomain(RR)． Theinteractionsbewt eenthethreedomainsofOrg35andNifA werestudied．Theresultsindicatedtheinteraction betweenOrg35nadNifAwasmediatedbyPASdomain． Keywords Azospirillumbrasilense，Ni￡ PER—ARNT—SIM (PAS)domain,Hybridwtocomponentsystemprotein, Fusionproteinpull—down 巴西固氮螺菌 ZO$pirillumbrasilense)可与玉米、 氮基因表达 。NifA蛋 白是固氮调控 中的核心因子 小麦、水稻等许多重要禾本科作物的根部联合固氮， (Austineta1．，1990；Fadel—Pichetheta1．，1999；Dixon 其适应能力强，是重要的联合固氮菌，具有较大的应 1998；Fischer，1994)。环境因子氧和铵对固氮作用的 用潜力(SteenhoudtandVanderleyden。2000；Bashanet 影响即是