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转基因动物研究概述 摘要　本文主要对转基因动物的研究进展及其常用的各种转基因方法、转基因动物的应用和研究前景进行概述，分析了当前制约转基因动物发展的主要因素，而加强相关基础理论的研究和克服转基因技术的瓶颈将会大大加快转基因动物发展的步伐。 关键词　转基因动物； 基因转移技术； 生物医药 2l世纪将是生命科学突飞猛进的时代，生命科学将在2l世纪人类生活中占有极突出的位置。其原因至少有二：一是生命科学的发展促进了其他学科的发展；二是生命科学发展带动的产业将推动世界经济的发展。利用转基因动物技术，既可加快家畜品种的改良速度．提高肉．奶、蛋的产量和品质，又可生产珍贵的药物蛋白．为大量患者造福。可以说转基因动物技术对于人们千百年来追求的丰表足食，延年益寿两大目标都将会作出巨大贡献。因而．诞生才不到20年的这一生物高新技术已成为近年来生物工程研究领域的热点之一。 1 转基因动物技术． 转基因动物技术是通过遗传工程的手段对动物基因组的结构或组成进行人为的修饰或改造，并通过相应的动物育种技术使得这些经修饰改造后的基因组在世代间得以传递和表现。利用这一技术，人们可以在动物基因组的特定位点引人所设计的基因突变, 模拟造成人类遗传性疾病的基因结构或数量异常；可以通过对基因结构进行修饰, 在动物发生、发育的全过程研究体内基因的功能及其结构、功能的关系；可以在动物基因组引入病毒基因组以模拟病毒性疾病的发病过程；可以通过引人具有重要药用价值蛋白的编码基因, 使动物成为该药物蛋白的生产农场；可以将所引人的DNA片段作为环境诱变剂作用的靶DNA, 通过对它回收后的结构分析, 研究诱变剂造成DNA损伤和诱发基因突变的规律。转基因动物技术不仅在生命科学研究中的应用越来越广, 技术本身的发展也越来越快, 朝着修饰和精确性与可调性日益逼近[1]。 2 转基因动物的研究进展． 我国是从1984年开始转基因动物研究的，并于同年最先获得了含人β－珠蛋白基因的转基因小鼠。利用显微注射法，1985年和1986年又分别获得了含人生长激素(MT－hGH)基因的转基因泥鳅和小鼠。1987年获得含有大肠杆菌galk和gpt基因的转基因小鼠。以后又相继获得了含HbgAg乙型肝炎表面抗原基因的转基因兔、转基因猪、含EPO基因和人乙型肝炎表面抗原基因(HbgAg)2种乳腺特异性表达的转基因山羊、含人凝血因子IX 的转基因山羊(1998)、含人血清白蛋白基因的转基因奶牛(1999)、含“生物钢”蛋白基因的转基因老鼠，且该基因在乳腺中得以表达(2000)[2]。 由此可见，转基因动物是目前生物工程研究领域中最具活力和商业化前景的高新生物技术[3]。 3 常用的转基因方法． 3.1 显微注射法 该方法是Gorden等人发明的。其基本原理是通过显微操作系统和显微注射技术将外源基因直接注射到受精卵的原核内，使外源基因整合到动物基因组，再通过胚胎移植技术将整合有外源基基因的受精卵移植到受体的子宫内继续发育，进而得到转基因动物。1982 年Palmiter应用此法获得转基因的“超级小鼠”引起世人瞩目。以后相继获得了转基因猪、绵羊、兔、牛、山羊等。 3.2 胚胎干细胞(ES)介导法 该法是将目的基因转移入ES细胞后，再重新导入囊胚或经筛选后对转入外源基因的ES细胞进行克隆，从而培育出转基因个体。1987年Thomas等利用ES细胞法结合同源重组技术制备出Hprt基因定点突变的转基因小鼠。此法在小鼠上应用比较成熟，在大动物上应用较晚。尽管建立大家畜ES细胞系仍很困难，但ES细胞介导法转基因仍是一条极具魅力的技术路线，随着一些相关关键技术的成熟，ES细胞介导法将会在转基因动物的研究中起到更加重要的作用。 3.3 体细胞核移植法 这种方法是先将外源基因导入去核的卵中，经融合、激活后再移植入假孕母体内，使其妊娠直至分娩。如克隆羊多莉和转基因绵羊保莉就是利用该法于1997年获得的，该法最大优点是后代100%为转基因个体，且在核移植前可以选择后代的性别，一旦产生转基因后代，其遗传背景及遗传稳定性一致，不需选配，仅一代就可建立转基因群体，节约时间和费用。但该技术亦有难度大，成功率低，胎儿成活率不高等缺点。 除上述方法外，还有基因打靶法、电脉冲法、磷酸钙共沉淀法、原生殖细胞介导的转基因技术等。 4 转基因动物的应用及研究前景． 4.1 转基因动物在医药领域的应用 4.1.1 应用于生物制药 利用转基因动物来生产贵重的医用药物是目前世界范围内转基因研究的热点之一，是转基因动物的一个非常重要的用途，它能生产出具有医药价值的生物活性蛋白质药物。一般通过以下5种途径：(1)通过血液。1992年制备的血液中含有人血红蛋白的转基因猪[4]，为从人以外的动物体获取珍贵的人血有效成分提供了一条新途径；(2)通过膀胱。1998年制备的