垂直板聚丙烯酰胺凝胶连续电泳分离乳酸脱氢酶同工酶.pptVIP

垂直板聚丙烯酰胺凝胶连续电泳分离乳酸脱氢酶同工酶（活性染色鉴定法） 实验原理 关于垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳 关于连续系统和不连续系统 关于乳酸脱氢酶同工酶及酶活性染色 垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳 电泳 带电颗粒在电场的作用下，向着与其电性相反的电极方向移动，这种现象称之为电泳。 聚丙烯酰胺凝胶 是由单体丙烯酰胺(Acr)和交联剂N,N’-亚甲基双丙烯酰胺(Bis)在催化剂过硫酸铵(AP)和加速剂N,N,N’,N’-四甲基乙二胺(TEMED)作用下聚合交联而成的三维网状结构的凝胶，通过改变凝胶浓度及交联度来调节凝胶的孔径，具有良好的分子筛效应。它已成为目前生化实验室最常用的支持介质。以它为支持物发展起来的各种聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，不仅能分离、小量制备生物大分子，而且可以用来研究生物大分子的性质如电荷、相对分子质量、等电点以及构象等。 垂直板电泳 将配制好的凝胶溶液注入到两块垂直放置的玻璃板之间聚胶，然后加样进行电泳。 AP-TMTED催化体系 TEMED催化AP生成硫酸自由基： S2O82－ 2SO4·ˉ 硫酸自由基的氧原子激活Acr单体并形成单体长链： Bis将单体长链间连成网状结构： 凝胶总浓度及交联度对凝胶的影响 凝胶溶液中单体和交联剂的总浓度和两者的比例是决定聚丙烯酰胺凝胶特性包括其机械性能、弹性、透明度、粘着