高效液相色谱法测定饮料中的合成着色剂.docVIP

高效液相色谱法测定饮料中的合成着色剂 唐传禹 内蒙古食品药品检验所 呼和浩特 （010020） 摘要 目的：探讨高效液相色谱法测定饮料中的合成着色剂。方法：采用C18液相色谱柱，以甲醇：乙酸铵溶液(pH=4)为流动相梯度洗脱。结果：柠檬黄、苋菜红、胭脂红，三种着色剂分离完全，灵敏度高，出峰时间较短。平均回收率为91.5％—97.5％，相对标准偏差为3.1％—4.5％。结论：该方法对样品检测快、灵敏、准确。 关键词：高效液相色谱 饮料 合成着色剂 Abstract Aim: Determination of beverages in the synthetic coloring agent. Methods: Using liquid C18 column, methanol: ammonium acetate solution (pH = 4) as the mobile phase gradient elution. Results: lemon yellow, red amaranth, Carmine, the coloring agent are completely isolated, high sensitivity, a shorter time to peak. The average recovery rate was 91.5% -97.5% and the relative standard deviation of 3.1% -4.5%.Conclusion: The method of testing samples fast, sensitive and accurate. Key Words: HPLC Beverage Synthetic coloring agent 食用合成色素多以苯、甲苯、萘等化工产品做原料，经有机反应化合而成。我国批准已使用合成色素21种，其中较常用的有柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝等。本方法采用C18液相色谱柱，将合成着色剂采用最佳流动相配比，做梯度洗脱，基本消除了基线漂移的影响，提高了检测速度和灵敏性。 1 材料与方法 1．1 仪器与试剂 1．1．1 仪器 安捷伦1100高效液相色谱仪， 真空抽气泵，超声波清洗器。 1．1．2 试剂 甲醇(色谱纯)、乙酸铵(分析纯)、聚酰胺粉（60～90目）、氨水(1+50)、柠檬酸溶液(200g／L)、甲醇一甲酸(6+4)、无水乙醇一氨水一水(7+2+1) 1．1．3 标准品 1．1．4 标准溶液用去离子水将国家标准物质中心出GBW (E)100001a、100002a、100004a色素系列标准稀释至0.5mg/ml溶液，经0．45μm滤膜过滤备用。 1．2 方法 1．2．1 色谱条件 色谱柱资生堂-C18 5μm 4.6×250mm；紫外检测器，波长：254nm流动相：甲醇：乙酸铵(0．02mol／L)；流速1.00(ml／min；柱温：30℃；进样量：10μl。 1．2．2 样品处理 取试样溶液10g，加热至60℃，取1g聚酰胺粉（60～90目）加少许水调成糊状，加入试样溶液中，搅拌，用G3垂融漏斗抽滤，用水（60℃pH＝4）的洗涤3次，再用甲醇－甲酸（6＋4）混合溶液洗涤3次，再用水洗至中性，用无水乙醇－2％氨水－水（7＋2＋1）混合溶液解吸3次，每次5ml，收集解吸液，加乙酸中和，蒸至近干，加水使溶解，定容至5ml，即得。 2 结果与讨论 2．1 色谱条件的选择 通过对几种色谱的波长扫描，找到主要吸收波长，将不同色素吸收波长进行对比，经反复实际测试，确定本组的最佳测定波长。在测定中，将流动相(甲醇+乙酸铵)按不同比例混合，得到最佳分析条件，在这些条件下，各着色剂分离完全，灵敏度高，出峰时间较短，分析速度快。各着色剂的测定条件见表1。色谱图见图1～4。 2．2 方法的最小检出量和最低检测浓度 在与样品测定完全相同的条件下。用两倍的噪声水平相当的着色剂含量作为最小检出量，本方法的最小检出量为柠檬黄4ng、苋菜红2ng、胭脂红3ng，当理样量相当于0．025g时最低检测浓度为柠檬黄0．16mg／kg、苋菜红0．08mg／kg、胭脂红0．12mg／kg。 2．3 精密度与回收率准 确称取10．0g混匀样品5份，分别精密加入含量为1．00mg/ml的着色剂标准溶液0.05ml，按拟定方法进行样品处理，经高效液相色谱仪测得平均回收率为91.5％—97.5％，相对标准偏差为3.1％—4.5％ 。 3 小结 采用本方法对样品进行测定，提取效率高，损失少，方法稳定，精密度和准确度均获得满意的结果，能满足分析要求，很有实际应用价值。 参考资料 [1]颜琪．液一液分配高效液相色谱法测定饮料中合成色素的研究[J]．工业科技，200