基质辅助激光解吸离子化质谱及其生物大分子分析中的应用.pdfVIP

维普资讯 一 有机化学 YOUJI HUAXUE，1997，17，498 506 综述与进展 占 ‘ 基质辅助激光解吸离子化质谱及其在生物 大分子分析中的应用 V 昊忆南 陈耀祖 · 潘远江 沈 飙 一 (浙江大学化学系， 浙江，杭州．310027) (兰州大学应用有机国家重点实验室，兰州，甘肃，730000) 摘要 ：近年来质谱离子化技术方面有两项重要成果：基质辅助激光解暇离子化(n1at血一a~stedlaserdesorption ionizatic~，MALDI)~ 喷雾离子化(d耽Ⅱ唧 rayionization，ESI)。MALDI和ESI的应用使质谱在生物大分子研究 方面取得重大突破 本文仅就MALDI的原理、特点、样 品准备方法、基质的选择、仪器条件及其在生物大分子应用 方面的最新进展进行简要的综述。 关键词：基质辅助激光解暇离子化，飞行时间质谱，傅利叶变换离子回旋共 谱，生物大分子 一 E51 朋，9LDI LDI 在过去的二十年问，有机质谱通过发展一些新的电离技术在分析大分子量，极’性及热不稳定化 合物方面取得很大进展。每一次进步都起始于一种新的离子化方法 ，紧随其后的实验条件及样品 准备技术的研究使之进入实用阶段。快原子轰击质谱 (FAB—MS)解决了一些 中等 (10～ 10Da)多肽的分子量及序列的测定_lJ，但对分子量更大的分子的测定仍受到限制。 激光解吸离子化质谱 (LDI—MS)早巳被作为分析非挥发有机物的重要手段，并成功地用于 对合成聚合物和热不稳定生物小分子的研究。但激光解吸测定的分子量均低于 3000IM。这是因 为只有化合物能较好吸收激光时才能产生解吸，对于吸收不好的化合物就要加大幅射，这样大量的 能量直接沉积到化合物上就会破坏其结构，激光解吸对大分子量的测定受到很大限制 J。 1988年Tanaka，Hillenkamp分别提出使用基质辅助以获得大分子离子b．4，该方法将样品加 入能强烈吸收激光的基质中，基质将激光的能量传递给样品，以产生分子离子，从而避免了直接用 激光照射分析物，为分析生物大分子提供了一个理想的方法。基质辅助激光解吸 目前已广泛应用 于多肽 蛋白质，低聚核苷酸，低聚糖等生物大分子的研究中。 1 基本原理 共振吸收化合物的解吸过程是固相到气相的非平衡相变。蛋 白质和氨基酸对激光的吸收一般 都很弱，解吸比较困难。MALDI提供了一种新的能量吸收途径 ：将样品与能强烈吸收激光的化学 基质按一定比例配成溶液，溶剂挥发后形成 “固态溶体”，激光照射 “固态溶体”时能量存积在分析物 周围的基质中，然后再传递给样品形成离子(图1)。 1996—02—19收稿 ，1997—06～23修 回。 **奉项 目获得 国家教委高等学校博士学科点专项科研基金资助。 维普资讯 第 6期 有 机 化 学 499 医 一互 一 一匡 匿 一匿 一匾 I．．．．．．．．．．． 图1 MALDI—MS的基本过程 Fig．1 ThemainprocessofMALDI—MS 基质的具体作用通常被认为包括以下几个方面 I】J： 首先基质相当于样品分子的 “溶剂”，样品分子被基质彼此分开，这种分离作用削弱了样品分子 之间的相互作用。然后基质分子从激光脉冲中吸收能量并转化为