双歧杆菌原生质体制备及serpin缺失株构建.pdfVIP

摘要 41610 Y21 摘要 inhibitor)是一种多肽类丝氨酸蛋白酶抑制剂的总称， Serpin(serine protease 由350至500个氨基酸组成。2006年研究发现长双歧杆菌的菌体表面存在着 Serpin，能够保护菌体抵抗外源蛋白酶的消化，为其粘附定植肠道提供前提条件。 目前，Serpin蛋白对双歧杆菌物质代谢，繁殖扩增等方面的影响不甚清楚。在 前期研究中，本实验室筛选到一株产Serpin蛋白的婴儿双歧杆菌，证实原核克 隆表达的Serpin蛋白能有效抑制糜蛋白酶和胰弹性蛋白酶的活性，并促进双歧 ’杆菌体外粘附细胞；本研究拟通过导入置换型打靶载体，构建基因缺失株的方 法，进一步研究表面蛋白Serpin的功能。然而由于双歧杆菌的细胞壁过厚，外源 基因导入困难，导致转化效率极其低下，因此本研究一方面要获得高活力的双歧 杆菌原生质体，另一方面通过原生