创新设计高考生物一轮复习方案 1-1 微生物的培养和利用 新人教版选修1.docVIP

选修一　生物技术实践 第1讲　微生物的培养和利用 (1)微生物的分离和培养　(2)某种微生物数量的测定　(3)培养基对微生物的选择作用　(4)利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用 知识点一　微生物的培养 1．培养基 概念：人们按照微生物对①________的不同需求，配制出的供其②________的营养基质 营养构成 　议一议：高温灭菌的原理是什么？ 2．无菌技术 消毒 灭菌 　想一想：接种过程为什么要在酒精灯的火焰旁进行？ 3．微生物培养的基本技术 (1)配制培养基：称量→混合→溶化→调pH→分装→包扎 (2)灭菌：加水→加培养基→密封→排冷气→维持压力→取出倒平板(或搁置斜面) (3)接种 (4)培养：接种后的培养皿放入恒温箱内培养 　查一查：什么是菌落？它有什么用途？ 知识点二　微生物的利用 1．菌种保藏 (1)临时保藏 (2)长期保存法：________法，放在________下保存 2．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (1)菌种筛选 (2)统计菌落数目 (3)设置对照 3．分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选 (1)土壤取样：选择富含________的环境 (2)将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 A．制备鉴别培养基：主要碳源是________ B．刚果红染色法 a．先培养________，再加入刚果红进行颜色反应 b.________时加入刚果红 (3)进一步鉴定 a．为确定得到的菌是否是纤维素分解菌，还需进行________的实验 b．测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量测定 　想一想：什么叫选择培养基？ 看一看：纤维素分解菌筛选的原理是什么？ 1．培养基的配制原则 (1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。 (2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 (3)pH要适宜：细菌为6.5～7.5，放线菌为7.5～8.5，真菌为5.0～6.0，培养不同微生物所需pH不同。 2．培养基的营养构成 (1)各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐； (2)不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 3．配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项 (1)倒平板的适宜温度是50 ℃左右，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固； (2)平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 4．两种纯化细菌的方法的比较 项目 优点 缺点 适用范围 平板划 线法 可以观察菌落特征，对混合菌进行分离 不能计数 适用于好氧菌 稀释 涂布 平板 法 可以计数，可以观察菌落特征 吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌 自我校对： ①营养物质　②生长繁殖　③水　④碳源　⑤氮源　⑥无机盐　⑦特殊营养物质　⑧氧气　⑨温和　有害的微生物　芽孢　孢子　煮沸消毒法　巴氏消毒法　所有的微生物　灼烧　干热　高压蒸汽　接种环、涂布器　平板划线　稀释涂布平板　酒精灯火焰　固体斜面　菌落　4 ℃　不长　污染　甘油管藏　－20 ℃　选择培养基　尿素　稀释涂布平板法　显微镜直接计数　×M　被测试的条件　非测试因素　纤维素　CMC—Na　微生物　倒平板　发酵产纤维素酶　葡萄糖 议一议：高温可以使菌体细胞内的蛋白质、核酸变性失活，从而达到灭菌的目的。 想一想：因为这里是一个无菌区，可以避免杂菌污染。 查一查：菌落是单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，形成的一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体。不同细菌的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面的特征不同，它可以作为鉴别菌种的重要依据。 想一想：选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。目的是培养、分离出特定微生物。 看一看：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素，从而使菌落周围形成透明圈。 微生物的实验室培养及相关技术 一、微生物的营养要素及培养基配方 基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 营养要素 来源 功能 碳源 无机碳源 CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物 ①构成细胞中的物质和一些代谢产物；②既是碳源又是能源 有机碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等 氮源 无机氮源 无机氮：NH3、铵盐、硝酸盐、N2等 将无机氮合成含氮的代谢产物 有机氮源 牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸 合成蛋白质、核酸及含氮