Runx2-树突状细胞基因疫苗诱导特异性细胞免疫杀伤三阴乳腺癌.pdfVIP

第36卷 第 3期 中山大学学报 (医学科学版) Vol|36 No．3 2015年 5月 JOURNALOFSUNYAT-SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES) Mav 2015 Runx2一树突状细胞基因疫苗诱导特异性细胞免疫杀伤 三阴乳腺癌 汤 谧，张翘楚，张 鹏，刘瑞磊，姜 华 ，黄 勇 (中山大学附属第三医院 甲状腺乳腺外科，广东广州 510630) 摘 要：【目的】探讨Runx2基因在乳腺癌中分布及Runx2一树突状细胞(DC)疫苗能否在体外诱导产生针对三阴乳腺癌 的特异性抗肿瘤效应。方【法】RT—PCR、免疫细胞化学和Westernblot检测Runx2在三阴乳腺癌、非三阴乳腺癌和正常乳腺细 胞中表达；提取健康人外周血并分离 DC，流式检测 DC表面标志；制备 Runx2过表达慢病毒，转染DC并分为转染组 、阴性对 照组及空白组，荧光显微镜、PCR和Westemblot检测各组转染效率；将各组转染细胞与T淋巴细胞共培养 ，ELISA检测 IL一 12、IFN一 的分泌量，M1-r检测疫苗对三阴乳腺癌的特异性杀伤作用。 结【果】PCR结果示Runx2在MDA—MB一231、MCF7及 MCF10A中ACT值分别为 10．37±0．61、11．86±0．59、12．97-40．06(P0．05)。免疫细胞化学及Western显示MDA—MB一231中 Runx2蛋白呈强阳性 ，在 MCF7及 MCF10A中仅为弱阳性 ；本研究制备Runx2慢病毒在转染 DC后可以表达丰富绿色荧光 ， 证实 Runx2基因成功转导人成熟 Dc中。转染组与T细胞共培养后分泌 IL一12、IFN一 量 (pg／mL)分别为 170．33±5．03、 517．15±5．88，而阴性对照组的分泌量仅为 72．304-3．05、171．57-41．37(P0．05)，同时转染组诱导的细胞毒性T细胞对三阴 乳腺癌杀伤率(％)为6O．02-43．51，较对照组(25．57±3．64)增强(PO．05)。【结论】Runx2可能为三阴乳腺癌治疗新靶点，并 能成功转导Runx2至DC中制备 Runx2一DC疫苗，增强 DC对三阴乳腺癌的靶向性，从而高效诱导该疫苗在体外对三阴乳腺 癌的特异性杀伤作用。 关键词：Runx2；树突状细胞；三阴乳腺癌 ；基因疫苗 中图分类号：R73 文献标志码：A 文章编号：1672—3554(2015)03—0377—08 VaccineofRunx2-dendriticCellsCanInduceSpecificLethalEffectofTripleNegativeBreast Cancer TANGMi，ZHANGQiao—chu，ZHANGPeng，LIURui—lei，JIANGHua，HUANGYong (ThyroidandBreastSurgery，TheThirdAffiliatedHospital，SunYat—SenUniversity，Guangzhou510630，China) Correspondingto：HUANG Yong，E—mail：dryonghuang@189．cn Abstract：【Objective】TostudythecharacterofRunx2geneinbreastcancerandwhethertheRunx2一dendriticcell(DC)vaccine caninducespecificantitumoreffectontriplenegativebreastcancerinvitro． M【ethods】 TheexpressionofRunx2intriplenegative breastcancer， non-triplenegativebreastcancerand normalbreastcellswereanalyzed byRT—PCR， Immunocyt