蛋白质组学在肾移植中应用的进展.pdfVIP

·307· 主堡墨宣整焦苤查；!!!生!旦箜!!鲞筮!塑垦hi翌』Q垡!璺!!!坠!P!!坐!丛!z；!!!!y!!：!!!盥!：! 蛋白质组学在肾移植中应用的进展 王彬浩吴云红夏云龙朱亮 蛋白质组学研究是当今科研的一个热门领域，它推动了 众多学科研究的发展，比如肿瘤学和移植医学[1。]。蛋白质 增强激光解吸(SELDI)等。随后使用质谱仪对已离子化的 组学是研究在特定时间或环境下某个细胞或某种组织基因 粒子进行分析，现在常见的质谱仪包括飞行时间质谱仪 组表达的全部蛋白质。这个区域可以是一个生物体，一种特 (TOF)，四极杆质谱仪(Q)，离子阱质谱仪(IT)，傅立叶变换 定的组织或细胞，一个细胞器，或者体液，如血清或尿液[5‘j。 离子回旋共振质谱仪(FT—ICR)和静电轨道阱质谱仪。此 但是转录的可变性剪接、氨基酸序列的多样化和翻译后修饰 外，在经典的质谱仪基础之上，越来越多的蛋白质组学分析 导致蛋白质组的复杂性和多样性E“，使得对整个蛋白质组的 技术涌现出来，使得研究结果更加准确E13。“]。 研究极具挑战性。然而，随着蛋白质组学技术巨大的进步， 二、肾移植中蛋白质组学的应用 尤其是质谱仪(MS)的出现，蛋白质组学已经成为生物标记 目前，临床器官移植领域越来越多的研究开始应用蛋白 研究领域的重要工具[8]。相较于经典的单个蛋白质研究方 质组学技术，旨于发现能提示移植后急慢性排斥反应以及移 法，蛋白质谱的研究可以在整个蛋白质组的水平上分析疾病 植后功能障碍的生物标记。尤其在肾移植领域，蛋白质组学 相关改变，同时也可以证明某些疾病特异性生物标记的存 的应用最为广泛。 在。因此，在临床生物标记的研究中，众多研究人员应用蛋 1．肾移植后尿液蛋白质组学研究：肾移植后的蛋白质组 白质组学技术，期望能够发现疾病特异性的生物标记[9]。 学研究大部分集中于对患者尿液的分析[1’”]。2003年， 在移植领域，移植后急性排斥反应(AR)和慢性功能障 碍(CAD)是阻碍移植成功的关键原因，但是由于缺乏可靠的例已经通过组织活检被证实为发生排斥反应，另外的15例 非病理性检测指标，对于这两个临床过程的明确临床诊断依 没有发生排斥反应。随后他们应用表面增强激光解吸电离 然依赖于组织活检[10]。因此，基于移植蛋白质组学阐明免 飞行时间(SELDI—TOF)质谱对受者的尿液进行分析，确定 疫反应的病理生理学机制，旨于发现新的生物标记和治疗靶 了一组有助于临床诊断的候选生物标记，其相对分子质量分 点，同时使免疫治疗更加个体化，具有重要的基础研究和临 别为6．5kDa(AUC=0．839，PO．0001)，6．7kDa(AUC 床应用价值。 =0．839，P0．0001)，6．6 一、蛋白质组学技术 0．0001)，7．1ldga(AUC=0．807，PO．0001)和13．4kDa 现在质谱技术已经成为分析复杂蛋白样本的首选方法， (AUC=0．804，PO．0001)。 而临床蛋白质组学研究成功与否的最关键因素之一是样本 Schaub等[19]在他们的研究中将受者分为四组，即急性 的质量。在样本的采集和处理过程中，应使所有待分析的蛋 排斥反应组(以=18)、稳定移植组(行=22)、急性。肾小管坏死 白样本全部处于溶解状态，并且有效防止蛋白质变性。对于 组(行=5)和反流性肾小球萎缩组(行=5)。运用质谱技术检 复杂的蛋白质或肽类混合物，进行质谱分析之前必须将蛋白 测受者的尿液，他们发现了三个明显的峰簇，急性排斥反应 质分离，常用的方法有双向聚丙烯酰胺凝胶电泳 组中有17例(94％)出现，稳定移植组仅有4例(18％)出现，