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钾离子通道阻滞剂4-AP 对人舌鳞癌Tca8113 细胞生长影响的研究 研 究 生： 伍宝琴 导 师： 聂敏海 教授 指导小组成员： 刘兴容 教授 熊 霞 教授 吴剑波 教授 龚 莉 教授 本课题基金资助： 泸州医学院自然科学科研项目 [泸医院科（2010 ）] 四川省教育厅课题[ 08zb089] 本实验在泸州医学院口颌面修复重建和再生实验室完成 目 录 1 钾离子通道阻滞剂4-AP 对人舌鳞癌Tca8113 细胞生长影响的 研究……………………………………………………………1 1.1 中文摘要………………………………………………………1 1.2 英文摘要………………………………………………………3 1.3 前言……………………………………………………………5 1.4 材料与方法……………………………………………………7 1.5 结果……………………………………………………………12 1.6 讨论……………………………………………………………24 1.7 结论……………………………………………………………30 1.8 参考文献………………………………………………………31 1.9 英汉缩略词对照表……………………………………………35 2 致谢……………………………………………………………36 3 钾通道阻滞剂4-氨基吡啶的研究新进展（综述）…………39 钾离子通道阻滞剂4-AP 对人舌鳞癌Tca8113 细胞生长 影响的研究 摘 要 口腔颌面部最常见的恶性肿瘤之一就是舌鳞状细胞癌 (tongue squamous cell careinoma, TSCC)，该病患者中男性比女性多见，由于舌体特殊的位置和其 所担任的重要功能，一旦受损，将给患者的生活生存质量带来极大的挑战。目 前，对于肿瘤的研究多集中于肿瘤标记物和治疗靶点的寻找。钾通道（potassium channel)是细胞膜上一类分布最广，类型最多的离子通道，其中的电压门控型钾 通道（voltage-gated K+ channels, Kv ）广泛存在于兴奋性和非兴奋性细胞的细胞 膜上，且参与了多种细胞的生理功能，对多种细胞的增殖、周期以及凋亡都有 一定的影响。4-氨基吡啶（4-aminopyridine，4-AP ）是一类电压门控型钾通道阻 滞剂，可以选择性的阻断Kv 通道。多项研究表明，4-AP 可以抑制多种肿瘤细 胞的增殖，诱导细胞凋亡，并参与细胞周期的调控。目的：本实验采用CCK-8 法检测4-AP 对人舌鳞癌细胞株Tca8113 细胞的增殖影响，流式细胞术检测4-AP 对人舌鳞癌细胞周期的调控及细胞凋亡率的检测，意在研究 4-AP 对人舌鳞癌 Tca8113 细胞生长的影响，探寻4-AP 对该细胞生长影响的可能的机制，以期为 人舌鳞癌的预防、诊断和治疗提供可靠的理论依据。方法：1. 采用CCK-8 法 检测浓度为1,5,10,20,50,100mmol/L 的钾离子通道阻滞剂4-AP 分别作用于人舌 鳞癌Tca8113 细胞 12h,24,48h 后，酶标仪检测各组细胞的OD 值，计算各浓度 4-AP 在不同时间对Tca8113 细胞的增殖抑制率；2. 浓度为5,10,20,50mmol/L 的 4-AP 干预人舌鳞癌Tca8113 细胞24h 后，70%酒精固定细胞 12h，流式细胞术 (Flow cytometry, FCM )检测各组细胞周期；3. 浓