基因的转录和调节.ppt

基因信息的传递及其调控 1958年，Crick提出分子生物学的“中心法则”，central dogma，阐明了从DNA到蛋白质的遗传信息流动方向和过程。最初的中心法则认为 ①遗传信息包含在DNA的碱基顺序中，通过DNA的复制使其代代相传； ②DNA遗传信息通过转录传递给mRNA，再通过翻译传递给蛋白质，生物的性状由蛋白质决定 ③遗传信息的传递可以由DNA到DNA，DNA到RNA， RNA到蛋白质，但遗传信息一旦进入蛋白质就不能再传出。 这些观点涵盖了大多数生物遗传信息贮存和表达的基本规律。 1970年，Temin发现了逆转录现象和逆转录酶，表明少数RNA也是遗传信息的携带者，并阐明了生物界中另外一种遗传信息的流动方向，从而使“中心法则”更加完善 而最近“朊病毒，prion”概念的提出，表明蛋白质也可能是遗传信息的载体，这一观点对中心法则提出了挑战。 就单个生物体而言，其所有细胞都具有同样的基因，然而不同组织细胞的基因表达情况不同，有些基因被启动进行表达，有些基因被抑制不表达或少表达。即使在同一类型细胞的不同发育阶段，基因表达情况也有不同。基因表达调控遵循一般的规则，即一个体系在需要时被打开，不需要时就被关闭或抑制。这种基因“开”和“关”的控制是通过对基因信息传递过程的多个环节来实现的。 第一节基因转录和转录后加工 第二节 基因信息表达调控及应用 基因的转录过程 (三)原核生物的转录终止有两种不同方式 当核心酶沿模板3’一5’方向移行至DNA链的终止部位时，识别模板上特殊结构后便停顿下来不再移动，同时转录产物RNA链从转录复合物上释放出来，即转录终止。原核细胞和真核细胞转录终止机制和方式并不相同，这里主要探讨原核生物的转录终止。原核生物的转录终止分为 两大类，依赖ρ因子, Rho factor的转录终止和不依赖ρ因子的转录终止。 1．依赖ρ因子的转录终止 ρ因子是由6个相同亚基组成的六聚体蛋白，它具有两大生物活性：①解螺旋酶活性；②依赖RNA的ATP酶活性。 一般认为， ρ因子能对含有Poly C的RNA有较强的亲和力，转录终止阶段新合成RNA链出现富集的Poly C序列， ρ因子与其结合后能向RNA聚合酶方向移动，移动需要的能量来自于ATP酶水解ATP提供。p因子接触RNA聚合酶后，二者的构象发生改变，并利用其解螺旋酶活性拆离DNA-RNA杂化双链, 从而使转录产物从转录复合物中完全释放出来，转录终止。 ρ因子参与转录终止过程 2．非依赖ρ因子的转录终止 此种转录终止不需要蛋白因子参与，而是利用新合成的RNA链自身的某些特殊结构来终止转录。在DNA模板链接近转录终止的区域内有较密集的A T配对区和自身互补序列，这样使转录产物RNA的3’端常有若干个连续的U序列和自身互补序列形成的茎环，stemloop结构或发夹结构，hairpin structure。这两种结构是阻止转录继续进行的关键，其原因可能在于，发夹结构形成可能改变了RNA聚合酶构象，导致了酶-模板结合方式的改变，RNA聚合酶则不再向下移动，同时连续的U序列也能促进RNA聚合酶从模板上脱落下来。 RNA的发夹结构与转录终止 真核细胞转录终止方式与原核细胞不同，而是与转录后的修饰密切相关。目前发现，在模板链读码框架的3’端之后，常有一组共同序列AATAAA，再下游还有相当多的GT序列，这些序列称为转录终止的修饰点。当转录越过修饰点后，mRNA在修饰点处被切断，随即加入polyA尾巴和5′帽子结构，并被释放出来。越过修饰点后RNA虽然能继续转录，但很快被降解。 三、初级转录产物需经过转录后加工才具有活性 绝大多数原核生物转录和翻译是同步进行的，在转录生成mRNA的同时，核蛋白体即附着在mRNA上并以其为模板进行蛋白质的合成，因此原核细胞的RNA并无特殊的转录后加工过程。真核生物转录和翻译在时间和空间上是分开的，刚转录出来的RNA是分子很大的前体，需经转录后的加工过程才能转变成成熟的RNA。 (一)hnRNA进行首尾修饰和内含子剪接后转变为成熟的mRNA 真核细胞mRNA前体称为不均一核RNA，hnRNA，它在细胞核内合成，必需经过一系列加工修饰过程才能转变为成熟mRNA，主要加工修饰包括以下几个方面 1．5-末端加上“帽子”结构 在鸟苷酸转移酶催化下，在真核生物hnRNA的5-末端加上一分子鸟苷酸残基。然后对该残基进行甲基化修饰，使其成为7甲基鸟苷酸，该结构称为“帽子”。其功能是 ①增加mRNA稳定性，保护mRNA免遭5′-核酸外切酶的攻击而被降解。②与蛋白质生物合成起始有关。它是mRNA作为翻译起始的必要的结构，可以