植物细胞工程材料.docVIP

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  • 2015-11-21 发布于安徽
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第八章 植物基因转化受体系统 有多种途径将外源基因导入植物细胞,概括起来分为3类: ① 生物介导,如农杆菌等介导的基因转移;② 物理方法,以基因枪法为代表; ③ 化学方法,以聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)为主。 根据Hemmer (1998)对28种转基因产品的统计,通过农杆菌介导的基因转化占64%,基因枪法占24%,PEG和电击法占7%,其他方法为5%。 1. 农杆菌介导的植物遗传转化技术 高等植物中农杆菌介导的遗传转化需具备以下几个条件: a. 植物外植体必需能够产生乙酰丁香酮(acetosyringone, 3’,5’-二甲氧基-4’-羟基乙酰苯)或其他相关化合物来激活vir基因,或用合成的乙酰丁香酮对农杆菌进行预诱导; b. 诱导的农杆菌应该能够进入处于适宜转化状态的植物细胞 c. 转化的细胞或组织应该能够再生成完整植株。 农杆菌转化的三种方法 a.整株感染法 此法是模仿根癌农杆菌天然的感染过程,用根癌农杆菌直接感染植物而进行遗传转化的一种简单易行的方法; 具体做法是:人为地在植株上造成创伤,然后把含有重组质粒的根癌农杆菌接种在创伤面上。使根癌农杆菌在植物体内进行浸染实现转化。为了获得较高的转化频率,一般多采用无菌种子的实生苗或试管苗;诱导形成的瘤被切下作为愈伤组织培养,最后将转化的愈伤组织转移至含合适植物激素的培养基上诱导再生植株。 b.

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