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克隆技术 有些植物在多次继代培养后,会丧失细胞全能性的表达能力 原因:1.遗传物质发生不可逆转的改变 2.激素平衡被打破或外源激素作用的结果 植物组织培养的培养基 无机营养成分:植物所必需的大量元素及微量元素 有机营养成分 ① 含N物质:包括维生素和氨基酸 ② 碳源:2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂:起凝固支持作用 生长调节剂:(生长素,细胞分裂素) PH值:5.0-6.0 愈伤组织: * 无性生殖 第二节 植物的克隆 天使花房 手指玫瑰 1、概念 受精卵 生殖细胞 体细胞 > > :植物体的每个活细胞具有遗传上的全能性,都具有发育为完整植株的潜能,叫做植物细胞全能性。 2、原因 3、全能性的体现: :从理论上讲,每个细胞都包含该物种的全部遗传物质(全部基因),所以每个活细胞都应具有全能性 。 一、植物细胞的全能性 植物细胞 动物细胞 不同种类植物或同种植物的不同基因型个体之间因遗传性的差异,细胞全能性的表达程度大不相同. 克隆成功所需的条件(a) 1.探讨特定植物细胞全能性表达的条件(激素配比) 2.选择性能优良、细胞全能型表达充分的基因型 思考讨论:为什么体内细胞没有表现出全能性,而是分化成为不同的组织、器官? 基因在特定空间和时间条件下选择性表达的结果。在个体发育的不同时期,生物体不同部位的细胞表达的基因是不同的,合成的蛋白质也不一样,从而形成了不同的组织和器官。 离体组织或器官,无菌 二、植物组织培养程序 1、配置半固体培养基 2、无菌操作从根茎叶等切取一些小块组织 3、获得愈伤组织 4、诱导愈伤组织 5、再生新植株出现 脱分化(激素) 通过调节营养物质和生长调节剂的适当配比(再分化) 蔗糖比葡萄糖便宜植物体内有蔗糖转化酶,可以吸收和利用蔗糖; 无菌培养 愈伤组织 植物组织块切口处的细胞在创伤的刺激下发生脱分化,继续分裂增殖,形成一种相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织。 植物细胞的脱分化:(避光)由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,又称去分化。 三、植物细胞培养(克隆)主要几种技术: 1、植物组织培养 克隆技术的基础 2、悬浮细胞培养(形成人工种子) 通过液体悬浮培养使愈伤组织分散成单细胞,经适宜培养基中成分的诱导,可发育成胚状体,从而形成新株。 3.器官培养 指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养。 指以单个游离细胞为外植体的离体无菌培养。 4.细胞培养 5.原生质体培养与植物细胞工程 指以原生质体为外植体的离体无菌培养。 *
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