一种高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法的建立--以水稻为例.pdf

4 福建稻麦科技，2015年9月（Sep.2015） ·基础理论· 一种高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银 染法的建立——以水稻为例 王运斌，江良荣，黄荣裕，黄育民，郑景生* （厦门大学生命科学学院，福建厦门361102） 摘  要：非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染技术已广泛用于DNA片段检测。介绍一种本实验室改进的高效省本的非变 性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染方法，该法将固定和染色两步骤合并，整个银染过程只需16 min即可完成。同时，该 法无需使用无水乙醇和冰乙酸，减少了硝酸银、氢氧化钠及甲醛的使用量。 关键词：非变性聚丙烯酰胺凝胶；电泳；银染 中图分类号：Q93-333    文献标识码：A     文章编号：1008 - 9799（2015）03 - 0004 - 05 A High-efficiency and Low Cost Method of DNA Silver Staining in Non-denaturant Polyacrylamide Gel Electrophoresis——An Example Based on Rice * WANG Yun-bin, JIANG Liang-rong, HUANG Rong-yu, HUANG Yu-min, ZHENG Jing-sheng （School of Life Sciences, Xiamen University, Xiamen, Fujian 361102 ） Abstract: A method of silver staining in non-denaturant polyacrylamide gel electrophoresis has widely been  used to detect DNA fragments. Here we developed a high-efficiency and low cost method of DNA silver  staining in non-denaturant polyacrylamide gel electrophoresis. The whole new procedure of silver staining has  combined two steps of fixation and staining into one step and can be completed within 16 min. Furthermore,  the new procedure eliminates the use of ethanol and acetic acid and reduces the use amount of silver nitrate,  sodium hydroxide and formaldehyde in silver steps.  Key words: non-denaturant polyacrylamide gel; electrophoresis ; silver staining 随着分子标记技术的快速发展，聚合酶链反应 1  材料与方法 （PCR）结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染技术 1.1  材料 已广泛应用于水稻遗传连锁图谱构建、基因定位克 试验材料为随机选取的水稻“航2号”与“象 隆、分子标记辅助育种、遗传多样性分析等研究领 牙香占”杂交建立的BC3F2 分离群体部分单株分蘖 域，但非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳常规银染法比较 ［11］