高效纳米自组装人工过氧化物酶及研究.pdfVIP

摘要 本文利用半合成酶制备原理，采用内部疏水的SDS纳米胶团结构作为人工过氧化 物酶的外部结构：采用分子结构小、适用条件广且廉价易得的天然细胞色素C作为人工 过氧化物酶的活性催化中心结构；通过二者在缓冲溶液中发生自组装的方式构建人工过 氧化物酶，来模拟天然过氧化物酶的催化特性。 本工作主要采用光谱学方法、热分析方法及电化学分析方法对由细胞色素C和SDS 纳米胶团溶液自组装构建的人工过氧化物酶的催化反应能力、结构变化、白组装过程、 酶动力学、自杀性失活底物以及电化学特性进行检测。 首先，对人工过氧化物酶的表观催化活性进行测量：采用紫外可见分光光度计，用 过氧化物酶研究工作中最常使用的愈创木酚法测定人工过氧化物酶、细胞色素C及天然 辣根过氧化物酶(HRP)的表观催化活性，观察到了人工酶具有良好的催化过氧化氧及愈 创木酚发生氧化反应的活性。 第二，研究了人工酶的催化环境：包括溶液pH值、细胞色素C浓度、SDS浓度及 溶液离子强度在内的催化反应条件，实验得出在溶液pH值为10．5时，人工酶具有较高 的表观活性；且其表观催化活性与在一定浓度范围内的细胞色素C(1～10¨M)成线性关 系，且最适溶液离子强度随pH升高而升高；实验还得出人工过氧化物酶的表观催化活 性