刺五加胚性细胞团形成差异表达基因筛选克隆.pdf

摘要 摘要 senticosus 刺五jJ[1(EleutherococcusMaxim)是珍贵的药用植物，由于不合理采摘，野 生刺五加数量急剧减少，已被列入保护植物。对刺五加进行人工培育、扩繁，是满足人 们需求的主要途径，而建立高效的刺五加体细胞发生体系则是实现这一目的最为有效的 方法。体细胞胚发生是一个复杂的过程，应用分子生物学手段对这一发生机制进行研究 是十分有必要的，这对更好地保护这一珍贵物种具有重要的现实意义。 本文以刺五加的胚性细胞团和非胚性细胞团为材料，对以胚性细胞团方式产生的体 细胞胚相关基因进行了研究。对前期做过的基因芯片结果进行归类分析，从中挑选差异 倍数较显著且与体胚发生相关的基因进行定量PCR差异表达分析，结果表明，在选择 的上调基因中，有一个基因在定量结果中表现为下调，其余的所有基因的表达差异结果 均与芯片结果相同。通过同源性分析发现其余上调基因均与体细胞胚发生有直接或间接 的相关性，由于工作量过大，所以首先选择了其中三个基因进行RACE克隆分析，并将 基酸，同源性分析结果显示，该基因与拟南芥等物种儿丁基因具有高度同源性，具有 显示该基