小胶质细胞在SOD1-G93A转基因小鼠腰髓和运动皮层中的变化.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………6 研究论文 小胶质细胞在SODl．G93A转基因小鼠腰髓及运动 皮层中的变化 前言…………………………………………………………………一13月lJ舌………………………………………………………………… 材料与方法………………………………．．：………………………13 结果…………………………………………………………………21 附图…………………………………………………………………23 附表…………………………………………………………………28 讨论…………………………………………………………………29 结论…………………………………………………………………32 参考文献……………………………………………………………33 综述 神经变性病与神经炎症………………………………………37 致谢………………………………………………………………………45 个人简历…………………………………………………………………46 小胶质细胞在SODl．G93A‘转基因小鼠腰髓 及运动皮层中的变化 摘 要 lateral 目的：肌萎缩侧索硬化(amyotrophic 死性神经系统变性疾病，表现为进行性肌肉萎缩、肌无力和锥体束征。患 者多在首次出现症状后的3．5年内因球麻痹、呼吸衰竭或肺部感染而死亡。 病理上以选择性上或／和下运动神经元丢失为特征，伴有小胶质细胞及星 形胶质细胞活化。约5．10％为家族。I生ALS(familial 是散发性ALS(sporadic dismutase superoxide 物模型。 用人SODl(humanSOD，hSODl)转基因鼠进行体内和体外研究， mutant 发现人突变SODl(human 神经元受损，包括：异常蛋白质聚集、线粒体功能失调、氧化应激、细胞 骨架异常、轴浆运输受损、谷氨酸兴奋毒性、生长因子缺乏及神经炎症等。 神经炎症是指一种细胞和分子过程，包括小胶质细胞和星形胶质细 nervous 胞的活化及周围免疫细胞的浸润，在中枢神经系统(centralsystem， CNS)的多种病理条件下会发生，包括神经变性疾病如ALS等。神经炎 经变性疾病中神经炎症的共同特点。在ALS神经炎症部位，主要有星形 胶质细胞、小胶质细胞及少量的T．淋巴细胞。大量证据表明，炎症在ALS 中起关键作用，然而小胶质细胞．神经元相互作用导致运动神经元病的本 质仍然不明。目前广泛研究的是小胶质细胞慢性、有害的神经炎症引起神 经元变性。 究对象，应用免疫组织化学及激光共聚焦方法研究转基因小鼠疾病不同时 中文摘要 期运动皮层及腰髓小胶质细胞形态及数量变化，应用免疫印迹法研究小胶 质细胞特异性标记物随病程的表达变化，探讨小胶质细胞在SODl．G93A 转基因小鼠疾病进程中的变化规律，分析其运动神经元死亡中的可能作 用，为ALS治疗提供潜在靶点。 方法： l转基因鼠的繁殖 pathogen 进行喂养，每个鼠笼随机饲养3．5只小鼠。动物实验过程遵守河北省实验 Gur转基因小鼠 动物管理办法规定。为维持B6SJL—TgN(SODl．G93A)l 突变基因稳定下传，将B6SJL 鼠交配繁殖，两种小鼠均购自美国Jackson实验室(BarHarbor,ME， 因扩增鉴定，确定是否带有hSODl基因。 2运动功能评分及实验分组 2．1运动功能评分 运动功能评分从小鼠50天开始每天评分一次。采用4分评分系统。 (1)4分正常，无运动障碍； (2)3分悬尾时后肢震颤； (3)2分步态异常； (4)1分至少一侧后肢拖拽； (5)0分将小鼠仰或侧卧，30秒内