骨髓间质干细胞磁性标记示踪丹酚酸B盐协同间质干细胞修复大鼠脊髓损伤与研究.pdf

骨髓阎质千细胞的磁性标记示踪及丹酚酸B盐协同问质千细胞．耋复丈鼠脊髓损伤的研究 骨髓间质干细胞的磁性标记示踪及丹酚酸B盐协同 间质干细胞修复大鼠脊髓损伤的研究 专 业： 病珲学与病珲牟理学 硕士研究牛： 毕小彬 导 师：邓宁斌教授 中文摘要 stem 干细胞包括胚胎．F细胞(embryoniccelIs，ESCs)和成体下细胞，这 类细胞可以在体外培养和快速增殖，同时具有向自我更新和多向分化潜能，是目 前多种疾病实验研究和临床治疗的热点。下细胞移植后能够分泌治疗往物质，并 可能修复和替代损伤性疾病中受损的神经组织。因此，—r细胞移植为脊髓损伤等 中枢神经系统损伤性疾病带来了希望。骨髓间质干细胞(mesenchymalstemcells， 髑Cs)是成体干细胞的一种，获取简单，扩增容易，可在体外和体内向神经元样 细胞分化，受到研究者更多的重视。 cord injures，SCI)是临床常见疾病，给患者带来了极 脊髓损伤(spinal 大痛苦，严重影响患者的生存质量。脊髓损伤的药物治疗受限于有限的药物种类 和狭窄的治疗时问窗，康复治疗的效果也不能令人满意。目前，研究者更多将目 光转向千细胞移植治疗脊髓损伤，MSCs自然受到研究者的青睐。本室对MSCs单 独或结合神经营养因子及嗅鞘细胞治疗脊髓损伤的疗效和机制迸行探讨，肯定了 MSCs治疗脊髓损伤的有效性。 然而，HSCs治疗脊髓损伤的实验研究和临床应用也遇到和其他细胞移植同 样的问题：首先是用来区分宿主细胞与移植细胞的传统标记和识别方法只能在离 体情况下进行，显然，这些方法用于大动物实验或者临床研究时不可行。所以有 必要寻找能够在体示踪检测和追踪移植细胞命运的方法。将需要移植的细胞进行 resonance 磁性对比剂标记，通过磁共振成像(magnetic imaging，锨I)技术对 骨髓闻质千细胞的磁性标记示踪及丹酚酸B盐协同间质干细胞修复大鼠脊髓损伤的研究 其进ii町视化追踪，就能得知移植细胞在体内的运动信息以及未来命运。钆2旺 甲肇i胺五乙酸一叶酸(Gadolinium acid， 相比其他造影剂用于二细胞标记的优点在f其较少受到血流和J占J围其他lE常和非 正常组织结构信号的影响。那么，能否用Gd—DTPA标记ⅥScs来进行斟scs的在体 MRI示踪?这是本课题要探讨的一个重要内容。 nervous 另外一个问题是成年个体中枢神经系统(central system，cNS)， 尤其是损伤的CNS很可能不利于移植细胞的存活。即使是在细胞最好的状态-F进 行移植，据报道最多能有10％的移植细胞存活，而能够分化成为成熟神经元的 移植细胞则更少。虽然在脊髓损伤的实验研究中，很多研究者建议细胞移植时间 窗应选在损伤石7—10天，伊有证据表明存活细胞数量仍不乐观。大部分细胞治 疗用于打击性或压迫性脊髓损伤是采用髓内注射的方式，而注射器的刺入很可能 对受损脊髓造成又一次丈的损害。脊髓损伤后的微环境和随后注射造成的损害 necrosis 中，肿瘤坏死因‘f—Q(tumor factor-a，TNF—a)等炎症因子及其 acidB，Sal 引起的一系列炎症反应是一种藿要因素。丹酚酸B盐(Salvianolic B)是我国传统中药丹参(salvia 已有研究证明SalB具有很强的抗氧化作用和明显的抗炎作用。还有研究表明， 复方丹参注射液可以用于治疗脊髓损伤。那么，应用SalB能否促进移植的MSCs 的存活呢?这是本课题要研究的又一重要内容。 综E所述，本研究拟采用带有红色芡光的阳离子转染试剂jetPEI—FluoR负 镜检测G