Tau基因5′不翻译区、3′不翻译区、内含子基因多态性和家族性肌萎缩侧索硬化发病的研究.pdf

摘要 摘要 目的： 分析正常人群、家族性肌萎缩侧索硬化患者的Tau基因5’不翻译区、3’ 不翻译区、内含子基因多态性，结合临床资料，初步获得Tau基因57不翻译区、 37不翻译区、内含子基因多态性与家族性肌萎缩侧索硬化发病的关系，探索家 族性肌萎缩侧索硬化发病的可能机制，为前瞻性诊断、防治及判断肌萎缩侧索 硬化预后的研究提供新的理论基础和思路。 方法： 收集正常中国汉族人40例、家族性肌萎缩侧索硬化患者及其家系成员25 例的临床资料(包括遗传家系谱)和静脉血。提取外周血DNA，利用PCR扩增DNA 中Tau基因5’不翻译区、3’不翻译区、内含子目的片段，采用荧光标记法测 序分析Tau基因5’不翻译区、3’不翻译区、内含子的基因多态性位点，用 检验及Fisher确切概率法统计分析。 结果： l、临床资料数据：该家系中受累患者的临床表型存在不同，主要表现在病 情进展、起病年龄、首发症状及存活时间等不一致，可分为两组：(1)进展迅速 组：家系中I 了呼吸衰竭。平均存活时间为lO．2个月，从3个月至24个月不等。平均发病 年龄为36．6岁。他们大部分以肢体乏力起病，在该组中，所有患者均以肢体受 累发病，无l例以延髓受累发病。(2)进展缓慢组：家系中113病情进展缓慢， 于更长时间才出现延髓肌受累，进而出现呼吸衰竭。该先证者以肢体乏力起病， 先出现下运动神经元损害特征，症状出现后第3年才开始出现吞咽困难、声音 嘶哑等延髓肌受累现象，第4年开始有呼吸困难症状，但至今仍存活。发病年 龄为60岁，与进展迅速组相比，发病年龄更晚，存活时间更长。 2、本实验中FALS家系谱具有以下特点：l、本家系前3代连续均有患者， 每一个患者均有一个患病的父母；2、双亲未患病，子女不发病；3、存在男到 男，男到女的遗传方式，男：女比例是1：l，遗传与性别无关：4、第四代中尚 未出现患者。 摘要 3、测序比对后发现：Tau基因的5’不翻译区、37不翻译区、内含子基因 CG、135504CG、135554TG、136491 中存在18个多态性位点(分别为135451 GT、138278 AG、138325 AG、138300AG、138320 CG、138344AG、138380 TG、138417AG、138418TG、102922CT、105646GA、105655 TG、i05697 TG、107780GA、123972-123973 TCAA或AC)，各位点变异情况在FALS组的 TG、138278 出现率均高于正常对照组，但其中只有3个位点：即105697 AG、 138417 TG、 AG，在两组中出现率的差别有统计学意义PO．05(其中105697 138417 显著差别，无统计学意义。 4、Tau基因的5 7不翻译区、3’不翻译区、内含子多态性位点分布特点： 主要聚集于内含子9、lO与3 7不翻译区，大部分(75[56％])分布在内含子9和 10当中，3 7不翻译区至今已发现22个多态性位点。此次新发现的3个位点变 异均为单核苷酸多态性(SNP)。 TG、138278AG、138417 5、出现3个有意义多态性位点(即105697 AG) 的家系样本中，多为家系中第1II、Ⅳ代亲属，随访中均未有发病或其它症状； 家系中的患者未发现出现上述3个