含有cry8E基因绿僵菌工程菌构建致病机制初步分析.pdf

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2015-11-22 发布于安徽
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英文缩略词表英文缩写英文全称中文名称目录中文摘要……………………………。 I Abstract…………………………………………………………………………………………………………………．III 1弓I言………………………………………………………………………………………．． 1．1蛴螬的危害………………………………………………………………………………．1 1．1．1蛴螬的习性与为害特点………………………………………………………………一1 1．1．2蛴螬的生物防治研究进展……………………………………………………………一2 1．2昆虫病原微生物…………………………………………………………………………．2 1．2．1昆虫病原真菌…………………………………………………………………………一2 1．2．2昆虫病原细菌…………………………………………………………………………一3 1．3昆虫病原真菌分子致病机制及基因工程研究进展……………………………………．4 1．3．1昆虫病原真菌侵染与致病过程………………………………………………………～4 1．3．2与昆虫病原真菌入侵相关的酶………………………………………………………一5 1．3．2．1蛋白质降解酶……………… ……………．．5 1．3．3．2几丁质降解酶…………………………………………． ……………．．6 1．3．3．3酯酶和脂酶………。 ……………．．6 1．3．3基因工程………………………………………………………………………………．．7 1．4技术路线…………………………………………………………………………………．8 1．5研究目的与意义…………………………………………………………………………．9 2材料与方法…………………。 2．1含有crygE基因绿僵菌工程菌的构建…………………………………………………10 2．1．1菌株和质粒……………………………………………………………………………10 2．1．2培养基、抗生素与常用溶液配制……………………………………………………10 2．1．3酶与生化试剂…………………………………………………………………………12 2 2．1．4主要仪器设备…………………………………………………………………………1 2．2实验方法…………………………………………………………………………………13 3 2．2．1中间载体HCB一8e的构建……………………………………………………………．1 2．2．2 2．2．3农杆菌感受态细胞的制各……………………………………………………………17 7 2．2．4电击法转化根癌农杆菌………………………………………………………………l 8 2．2．6含重组质粒的农杆菌转化绿僵菌……………………………………………………l 2．2．7绿僵菌单孢分离及遗传稳定性测定…………………………………………………18 2．3转cry8E基因菌株的分子检测实验材料………………………………………………18 2．3．1主要试剂和药品………………………………………………………………………18 2．3．2主要溶液及培养基的配制……………………………………………………………19 2．3．3主要仪器设备………………………………………