苏云金芽孢杆菌晶体杀虫蛋白Cry1Ac基因在虫生真菌球孢白僵菌中表达.pdf

摘要 真菌杀虫剂具有效费比高、安全性好、能够发挥持续控制效果并且易于人工 培养等优点,但存在受环境影响较大、杀虫效果慢和效果不稳定等弱点, 因而一定 程度上限制了其大规模应用。为此人们一直在潜心研究虫生真菌的致病分子机 制，以寻找可通过基因工程手段进行改造的基因。 苏云金芽孢杆菌为革兰氏阳性菌，在菌体的稳定生长期可形成伴胞晶体蛋白 (parasporal crystal protein) ,又称杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal protein , ICP) 或 δ- 内毒素，是一类对害虫毒力强、致死速度快且对害虫天敌无毒性的昆虫病原微 生物，昆虫病原细菌苏云金芽孢杆菌晶体杀虫蛋白Cry1Ac基因表达的杀虫效果非 常好，但能否增强真菌的毒力尚不清楚。本研究将外源的苏云金芽孢杆菌的毒力 基因Cry1Ac分别转入重要虫生真菌球孢白僵菌的 两个野生型菌株：马尾松毛虫 分离株RCEF0013 ，以及玉米螟分离株RCEF3383 ，以构建两个单拷贝的Cry1Ac 超表达转基因工程菌株。本实验首先构建了含有筛选标记bar基因和外源基因 Cry1Ac的载体pbarGPE1-Cry1Ac，通过芽生孢子法将载体质粒转入该野生型出发 株RCEF0013和R