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中文摘要
金铁锁B一香树素合酶oDNA的克隆和原核表达
研究生：刘家佳(中药资源开发与利用)
指导老师：钱子刚教授
摘要
单种属金铁锁属植物，分布于云南，贵州、四川和西藏等省，主产于云南西北部、
中部和东北部，为国家二级保护植物，是“云南白药”的主要组成药材之～。长期
以来，金铁锁完全靠野外采挖，加之自然生长缓慢，因而野生资源迅速减少，自
然产量大幅降低。金铁锁资源已经不能满足“云南白药”等中成药的需求。金铁锁
的有效成分为金铁锁皂苷(主要是三萜皂苷)。p．香树素合成酶(p．AS)是三萜
皂苷合成途径中的关键酶，它催化三萜类化合物的合成。针对有效部位(三萜类
皂苷)生物合成途径中关键调节酶：金铁锁p．香树素合成酶(13-AS)的cDNA
的分离、原核表达和功能鉴定等进行研究，通过RT-PCR和cDNA末端快速扩
增(RACE)等方法克隆其全长cDNA，结合大肠杆菌的原核表达得到目的蛋白，
得到以下结果：
三萜皂苷生物合成途径中的关键酶基因：B．香树素合成酶全长cDNA，全长
2882bp，ORF长2284bp，编码760个氨基酸。
2．构建了p一香树素合成酶基因大肠杆菌的表达系统，通过大肠杆菌BL21(DE3)
表达了p一香树素合成酶，大小为87KD左右，与预测结果一致。
以上研究为保证金铁锁资源的可持续利用及为金铁锁次生代谢工程研究奠
定了重要基础。
关键词：金铁锁三萜皂苷p-香树素合酶克隆表达
金铁锁e．香树素合酶cDNA的克隆和原核表达
of eDNAofPsammosilenetunicoides
Cloning,Expressionp-amyrinsynthase
W．C．Wuet
C．Y．Wu，and
Liu Materia
Jiajia(ChineseMedica)
Professor
Directed Qian
by Zigang
PsammosilenetunicoidesW．C．Whet a
C．Y．Wu(Caryophyllaceae)ismonospeeif
ic ofthe isdistributedin nalTOW of
Yunnan,Gu
plant genera．It relativelyranges
to
andTibet．Oneofitsmaindistributionareasisfrommiddlen
izhou,Sichuan
orthwestemYunnan．It toSecondGradeconservationstatusanditis0
belongs
neofmedicinematerialsofYunnan Was famoustraditional
an
baiyao，which P
atent has and value．For ti
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