转萝卜过氧化物酶基因RsPrx1酶母表达条件优化及抗性机理与研究.pdf

摘 植物过氧化物酶的功能多样，在植物的生长过程中发挥着重要的作用，目前采用转 基因技术研究植物过氧化物酶功能是较为热门的课题，一方面更深入的了解了目的基因 的功能，另一方面也为目的基因的工业化应用提供了理论依据。本实验选用已经成功构 研究基础上，进一步对转基因酵母培养基优化，即在培养基中添加血红素O．5∥L，当培 养时间到达80h左右时向培养基中加入0．5ml／L微量元素混合物(0．59／LMgCl2、309／L FeCl2‘6H20、lg／LZnCl2。4I-120、0．29／LCoCh’6H20、lg／L CACl2-2It20、lg／LCuCl2和0．29／L 大分泌过氧化物酶酶活达到30．9U／ml，是优化前培养基所获得酶活量的5．92倍，经 SDS—PAGE电泳检测出目的条带的表达量也相对显著增强。 表明：诱导一不诱导培养条件下转萝b过氧化物酶RsPrxl酵母的抗盐、抗氧化及抗高 温和低温功能高于不诱导一诱导培养条件。其中，抗盐和抗高温功能最强。因此，不仅 证明了诱导一不诱导培养条件是研究外源基因功能的最佳培养条件，而且揭示了外源萝 卜过氧化物酶RsPrxl作为植物体内的保护酶体系，具有抗盐、抗氧化以及抗高温的作 用。 高盐环境一直是人们关注的重要的胁迫因子之一，对酵母开展盐胁迫机理研究也是 生物学研究的热点之一。但目前