绝经后甲状腺结节的雌激素水平和雌激素代谢相关基因的表达.pdf

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中文摘要 绝经后甲状腺结节的雌激素水平与雌激素代谢相关基因的表达 摘 要 目的:甲状腺结节是最常见的甲状腺增生性疾病。流行病学调查显示, 甲状腺结节的患病率女性比男性高4.5倍。体外细胞实验也证明,雌激素 雌激素在甲状腺结节的形成中可能发挥一定的作用。 然而,绝经后女性与相同年龄阶段的男性甲状腺结节的发病率相似, 且都随年龄的增加而增加。此阶段形成的结节与血清或甲状腺结节局部的 雌激素水平是否相关未见报道。 雌激素是一组低分子天然固醇类激素,在人体内有三种形式:雌酮 E3相比,对雌激素受体的亲和力最低,并且有抑制增殖、促进凋亡的作用。 甲状腺中的雌激素既可来自血液也可原位合成。甲状腺结节雌激素水平除 了与摄取、合成相关外,还决定于雌激素在细胞内的代谢转化。1713羟固 和HSDl7814贝J]催化E2向低活性E1的转化。 为确定绝经后女性全身和结节局部雌激素是否与甲状腺结节形成有 关,本实验以绝经后甲状腺结节患者为研究对象,通过测定其血清、结节 甲状腺增生性疾病中的作用,为预防和治疗该类疾病提供实验依据。 方法: 1取材和分组 甲状腺标本取材自河北医科大学第二医院腺体外科2013年2月至9月 手术切除的甲状腺肿物。结节和结节旁组织(1)分别置于冻存管中,冻 中文摘要 病理诊断。根据病理结果,甲状腺结节组织为结节组;结节旁正常甲状腺 组织为对照组。采集甲状腺肿物切除术前的患者空腹血清,用于甲状腺功 能以及El、E2、2ME2的测定。 2甲状腺功能的测定 (IRMA)测定血清TSH浓度。 3甲状腺组织和血清El、E2和2ME2含量的测定 3.1甲状腺组织匀浆的制备 甲状腺组织用生理盐水制备成1%的组织匀浆,用于蛋白质、组织E1、 E2和2Ⅷ2的测定。 3.2甲状腺组织中蛋白定量 以牛血清白蛋白为标准,用考马斯.亮兰法测定蛋白浓度,结果以 mg/ml表示。 3.3甲状腺组织和血清E1含量的测定 采用酶联免疫吸附剂测定法进行测定。组织中的E1含量以每毫克样 本蛋白含有的El表示(pg/mgpr);血清中E2含量以每毫升血清含有的E2 表示(pg/m1)。 3.4甲状腺组织和血清E2含量的测定 采用液相平衡竞争放射免疫分析法测定。组织中的E2含量以每毫克 样本蛋白含有的E2表示(pg/mgpr);血清中E2含量以每毫升血清含有的E2 表示(pg/m1)。 3.5甲状腺组织和血清2ME2含量的测定 采用酶免疫法测定。组织中的2ME2含量以每毫克样本蛋白含有的 2ME2表示(pg/mg (pg/m1)。 4Real.timePCR TotalRNA陆II bio.tek) 应用E.Z.N.A.TM R6934.01试剂盒(OMEGA FirstStrand Kit反转录试剂盒(cat 提取RNA。应用invitrogen公司的M.MLV mastermix(DBI Bestar@SybrGreenqPCR 进行扩增。基因的相对表达量用2卜△CD表示。 中文摘要 5数据分析 实验数据采用SPSS22.0软件进行统计学分析。数据经检验,不符合 正态分布,故计量资料采用中位数(最小值,最大值)表示,组间差异采用 关分析,PO.05为差异有统计学意义。 结果: 1~般资料 理类型为单纯结节性甲状腺肿17例,结节性甲状腺肿伴腺瘤样增生10例, 结节性甲状腺肿伴钙化、纤维化、囊性变5例。甲状腺功能正常的患者31 例,甲状腺功能亢进1例。 2绝经后甲状腺结节患者血清E2水平高于正常人 1,1 经单样本秩和检验,患者血清E2为58.87(40.2

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