丹参和补骨脂的体外抑菌活性及其隐丹参酮、二氢丹参酮Ⅰ的抑菌机制的研究.pdfVIP

摘要 本论文由三章组成。第一章综述了目前中药抑菌机制研究方法的进展。第二 章研究了丹参和补骨脂生品及炮制品体外抑制金黄色葡萄球菌(SA)、耐甲氧西 的抑菌圈、最低抑菌浓度(MIC值)及半数抑菌浓度(IC50值)。第三章研究了 (AKP)、胞外蛋白含量及SDS．PAGE电泳蛋白谱带变化的研究。 第一章中药抑菌机制方法研究进展 本章通过对中药抑菌机制方法有关文献的检索，综述了中药抑菌机制方法的 研究进展。 第二章丹参、补骨脂生品及炮制品的体外抗菌活性研究 采用纸片扩散法(K．B法)测定了丹参生品及炮制品的抑菌圈和最低抑菌浓 度(MIC)，液体培养法测定了半数抑菌浓度(IC50值)。 抑菌圈显示，炒丹参和酒月．参的抑菌活性较对应的生品活性增强，而丹参炭 的抑菌活性明显减弱，但仍具有一定的抑菌活性；其中炒丹参的甲醇总提取物浓 度在50 mm。 MIC值显示，丹参生品及炮制品的体外抗菌活性是：甲醇总提取物石油醚和乙 酸乙酯提取物正丁醇提取物，说明丹参抗菌作用的活性成分主要存在于极性较 小的石油醚部位和乙酸乙酯部位。IC50值显示，对SA，炒丹参(乙酸乙酯部位， IC50=0．26 rng／mL)和炒丹参(石油醚部位，IC50=0．3lmg／mL)的抑菌活性最好。 综上证明丹参生品及不同炮制品对SA、MRSA和ESBLs．SA的抑制作用明显， 不同炮制方法对丹参的抗菌作用产生了影响。 采用K．B法测定了补骨脂生品及炮制品的抑菌圈和MIC值，液体培养法测 定了IC50值。 抑菌圈显示，酒炙补骨脂的甲醇总提取物和石油醚部位在浓度为50mg／mL 时对SA、MRSA、ESBLs．SA的抑菌圈均为12mm，活性最好；补骨脂甲醇总 提取物和石油醚部位的活性明显好于乙酸乙酯部位和正丁醇部位的活性，经炮制 后乙酸乙酯部位和正丁醇部位均较生品的抗菌活性增加。MIC值显示，石油醚 均为31．3 mg／m1) p．g／disc。IC50值显示，对SA，酒炙补骨脂(石油醚部位，IC50=0．10 的抑制活性最好；对MRSA，补骨脂生品(甲醇总提取物，IC50=0．16 mg／m1)的 抑制活性最好；对ESBLs．SA，盐蒸补骨脂(甲醇总提取物，IC50=0．28 mg／m1) 的抑制活性最好。 作用明显，尤其是酒炙补骨脂抑菌活性增强的较显著，不同炮制方法对补骨脂的 抗菌作用产生了影响。 第三章隐丹参酮和二氢丹参酮I的抑菌机制研究 采用K．B法测定了隐丹参酮的抑菌圈和MIC值，液体培养法测定了IC50值。 在浓度为5 mg／mL； lC50值显示，隐丹参酮对SA的活性最好(IC50=0．0924-0．03mg／mL)。 通过测定电导率变化、碱性磷酸酶(AKP)的含量变化、胞外蛋白含量变化 抑菌机制。 Il 率、AKP及可溶性蛋白含量均增大，SDS．PAGE电泳显示蛋白谱带也明显发生变 化。说明隐丹参酮可能破坏了细菌细胞壁和细胞膜的结构，导致细胞膜通透性增 加，进而使细胞内容物外泄；同时推测隐丹参酮对细菌蛋白质的合成有一定影响， 使菌体内蛋白质减少，影响和阻碍细胞内蛋白质的表达，最终导致细菌正常生理 功能受损或丧失。 采用K．B法测定了二氢丹参酮I的抑菌圈和MIC值，液体培养法测定了IC50 值。抑菌圈显示，二氢丹参酮I在浓度为5 mm)大 mg／mL对SA的抑菌圈(12 ram)；MIC值显示，对SA的活性最好 于对MRSA和ESBLs．SA的抑菌圈(10