恩替卡韦在离体培养CD4T细胞中激动mTOR调控TregTh17分化研究.pdfVIP

J舢删舢删舢舢舢删删舢 Y2582797 目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………3 英文缩写…………………………………………………………………·6 研究论文恩替卡韦在离体培养CD4+T细胞中激动mTOR调控 Treg／Thl7分化的研究 前言…………………………………………………………………7日U吾………………………………………………………………………………………。。7 材料与方法……………………………………………………………·8 结果………………………………………………………………………………………13 附图………………………………………………………………………·14 附表…………………………………………………………………………………·17 讨论………………………………………………………………………………………·18 结论………………………………………………………………………………………·19 参考文献……………………………………………………………·19 综述Thl7细胞在自身免疫性疾病及慢性乙型肝炎中作用的研究进展22 致谢……………………………………………………………………………………………”28 个人简历……………………………………………………………………29 中文摘要 恩替卡韦在离体培养CD4+T细胞中激动roTOR调控 Treg／Thl7分化的研究 摘 要 目的：慢性乙型肝炎的患者常常由于各种因素会伴随着肝硬化及肝癌 的高风险。免疫反应(表现为慢性炎症反应和抗病毒效应)是慢性乙型肝 炎病毒导致这些风险非常重要的因素。核苷酸类似物是慢性乙肝患者的最 常用的抗病毒治疗药物之一，核苷酸类似物具有抑制HBV的复制，减轻 肝损伤，减缓病情的进展的作用。恩替卡韦作为新一代的鸟嘌呤核苷酸类 似物，对乙肝病毒(皿V)多聚酶具有抑制作用。 CD4+T helper细胞能够通过调节释放细胞因子调控免疫反应，可以分 cell cell 为辅助性T细胞1型(T 1，Thl)、辅助性T细胞2型(Thelp 2， help T Th2)和调节性T细胞(regulatorycells，Treg)。最近的研究发现慢性乙型 肝炎患者体内外周血和肝脏中Treg细胞数目增多。随着Treg水平的增高， 应，而在慢性乙肝患者中，Thl7含量也明显增高，并被认为是一种能够 触发肝损伤的细胞。但至今为止Thl7在抗病毒中的机制还处于研究中。 令人意外的是，已有研究表明，恩替卡韦在抑制HBV的DNA复制的同 可以通过调控HIF．1a来调节Treg／Thl7比率。 基于上述原因，我们拟通过建立模拟乙肝病毒刺激CD4+T细胞分化 细胞模型，选择用于抗乙肝病毒的临床一线药物恩替卡韦，验证恩替卡韦 方法：清晨空腹肘静脉采血12ml，肝素抗凝，等体积的PBS充分混 合，缓慢加入含有等体积的人淋巴细胞分离液的离心管中，1500r／min(离 6／f／ml。将细胞分为 及浓度为20ng／ml的IL．2)，将细胞密度调整为1木10 中文摘要 Foxp3进行蛋白印记检测。 结果： 1 2蛋白免疫印记试验结果表明，与C组相比，B组中HIF．1裱达显著升高 (氏O．05)，IL．1 1拘表达下降(氏O．05)。