几株基因工程链霉菌的构建.pdfVIP

摘要 链霉菌是重要的抗生素生产菌，其代谢过程的深入研究可以从基因水平解释 体内代谢物变化，以及对目标代谢产物的影响，从而为工业生产菌株的分子水平 优化提供方向。 乙酸是链霉菌无氧代谢的末端产物，乙酸累积抑制菌体生长和外源蛋白的表 达。乙酰．CoA是某些次级代谢产物的重要前体，在理论上阻断乙酰．CoA生成乙 酸的途径有可能促进菌体生长，同时增加目标产物的产量。敲除糖酵解途径中的 关键限速酶磷酸果糖激酶主要合成基因来使碳代谢流从糖酵解途径转移到磷酸 戊糖途径，可研究两条代谢途径对葡萄糖代谢的影响，以及不同代谢途径的中间 产物对次级代谢物质合成的作用，对初级代谢的进一步研究有指导意义。透明颤 菌血红蛋白所具备的捕捉和释放氧气的能力使之在宿主细胞发酵时可以更好地 满足宿主细胞氧气的需求。在链霉菌中表达透明颤菌血红蛋白，能够改善链霉菌 对高氧的需要，促进体内代谢，在理论上可能提高发酵过程中目的产物的产量。 本文利用RED敲除原理分两步敲除链霉菌乙酸代谢途径关键酶pta．ackA基 ＼ 因和磷酸果糖激酶基因pf允4]。通过同源对比