伤科熏洗汤剂提取工艺的质量分析及研究.pdf

I I III I I I IIII IIl U Ul 18 9923 Y1 目 录 中文摘要 ABSTRACT 前言……………………………………………………………………………1 第一部分伤科熏洗汤剂提取工艺研究……………………………………4 一处方组成………………………………………………………………4 二处方来源………………………………………………………………4 三临床应用方法…………………………………………………………4 四伤科熏洗汤剂提取方法的选择………………………………………4 五挥发油提取工艺预试验………………………………………………5 1处方中含挥发油的药材分别单独提取挥发油……………………5 2处方中含挥发油的药材合并提取挥发油…………………………5 六伤科熏洗汤剂的水提取工艺研究……………………………………6 l仪器与试药…………………………………………………………6 2方法与结果…………………………………………………………6 2．1正交试验设计……………………………………………………6 2．2提取工艺正交试验方法与结果…………………………………7 2．3优选工艺的验证试验……………………………………………9 2．4升麻素苷和5-o-甲基维斯阿米醇苷的含量测定……………10 3小结…………………………………………………………………17 8 4讨论…………………………………………………………………1 5伤科熏洗汤提取工艺路线…………………………………………20 第二部分 伤科熏洗汤剂的质量分析研究……………………：………．．21 一处方组成………………………………………………………………21 二处方中药材的质量标准………………………………………………21 1川芎…………………………………………………………………2l 2羌活…………………………………………………………………21 方法： 1．伤科熏洗汤剂的提取工艺研究：以水为溶媒，采用水蒸气蒸馏法 连接挥发油测定装置，回流提取，选择L9 34 的正交实验优选伤科熏洗汤 剂的水提取工艺条件。试验中，以处方药材中挥发油提取率和防风药材中 的提取总量为考察指标，以浸泡时间、提取时间、提取次数和加水量为考 察因素。采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，收集水提取液。采用高效液相色 谱法测定水提液中升麻素苷 C22H270。1 和5．O．甲基维斯阿米醇苷 c22H280lo 的总含量。 2．伤科熏洗汤剂的质量分析研究：采用薄层鉴别法对提取的伤科熏 洗汤剂中的防风、川芎、独活、羌活、白芷、桂枝、花椒、艾叶、伸筋草 等药材分别进行鉴别．采用高效液相色谱法测定伤科熏洗汤剂中防风的有 Zorbar SB．C18 4．6x250mm， 总量。HPLC法色谱条件为：色谱柱：Agilent 5岬 ；流动相：甲醇一乙腈一水 12：10：78 ；检测波长：254nm；流速： lml·min。1；柱温：30。C． 3．小鼠离体透皮试验：采用改良Franz装置对伤科熏洗汤进行小鼠皮 皮量。采用薄层色谱法检查接收液中防风、独活的小鼠离体透皮情况． 结果： 1．优选的水提取工艺条件为：药材加10倍量水，不浸泡，提取3次， IV 每次20min。由三批验证结果计算，伤科熏洗汤中挥发油的平均转移率为 44．4％，升麻素苷和5-0．甲基维斯阿米醇苷的平均转移率为29．6％。三批 验证结果为：处方药材三次提取液中挥发油提取率分别为o．137％ ml／g 、 基维斯阿米醇苷总量分别为1．707％0、1．556％、1．657％o。 2．质量分析研究：伤科熏洗汤剂中防风、川芎、独活、羌活、白芷、 桂枝、花椒、艾叶、伸筋草9味药材的薄层色谱鉴别方法简单，图谱清晰， 供试品溶液在与药材对照溶液相同斑点处有相应斑点出现，阴性空白对照 无干扰。升麻素苷和5-0．甲基维斯阿米醇苷含量测定结果：升麻素苷含 0．035—0．350斗g；5-0．甲基维斯阿米醇苷含量测定的回归方程： 阿米醇苷RSD为1．10％ 24h ；重复性试验：升麻素苷的平均含量为 苷含量分别为为3．19pg／ml、3．12p,g／ml、3．16pg／ml。 3小鼠离体透皮试验：用脱毛剂将小鼠皮肤脱毛，70％乙醇溶液为接 收液，测定伤科熏洗汤中升麻素苷和5-0．甲基维斯阿米醇苷在5h内的累 别出防风、独活成分在5h内能够透过小鼠皮肤进入到接收液中。 结论： 通过对伤科熏洗汤的水提取工艺条件、质量分析的研究及离体小鼠透 皮试验，为伤科熏洗汤的临床应用提供了相关药学研究资料和理论依据。 关键词：伤科熏洗汤提取工艺质量分析正交试验离体透皮试验 ABSTRACT objective： of on tot