抗新城疫病毒繁殖的短肽及突变体基因的克隆和在大肠杆菌中的融合表达.pdf

抗新城疫病毒(NDV)繁殖的短肽及其突变 体基因的克隆和在大肠杆菌中的融合表达 摘要 目白勺：化学合成抗新城疫病毒(NDV)繁殖的九肽二串联体 克隆和融合表达，为进一步研究两者的抗病毒活性奠定基础。 方法：根据文献报道的氨基酸序列，应用大肠杆菌偏爱密码子，设计 6位赖氨酸置换为酪氨酸，同样选择大肠杆菌偏爱密码子，得到其突变体基因。 在基因两端分别加入限制性内切酶EeoRI和SalI的酶切位点，在相邻 I I和8al 酶切后的克隆载体pUCl8连接、转化大肠杆菌DH5ct，经蓝白筛选，挑取阳性 菌落，抽提重组质粒，酶切、PCR鉴定并测序。酶切克隆重组体得到目的基因， 与经相同酶切后的表达载体pGEX．钉．1连接，转化大肠杆菌BL21，挑出阳性菌 37(2 落，抽提重组质粒，酶切、PCR鉴定并测序。将鉴定为阳性