交联血管紧张素转化酶聚集体的制备及其应用.pdfVIP

中文摘要 血管紧张素转化酶(Angiotensin．converting 压调节系统中起着重要的作用。ACEfl皂催化水解血管紧张素I转化为 血管紧张素II，并能使血管活性多肽缓激肽失活，从而导致血压升高。 游离ACE纯化制备过程复杂且稳定性差、难以回收、重复利用性 差，商品化ACE价格昂贵。因此，在实际应用中常将其固定化于适宜 的载体上制备出固定化ACE，以提高ACE的稳定性及重复利用性。但 载体的存在会“稀释酶活”，因此有必要发展一种无载体固定化ACE的 方法。 抑制ACE的活性可以降低血压。目前，治疗高血压的药物主要是 们将目光锁定低毒副作用的中药，希望能发现潜在的ACEI。但中药 成分过于复杂，建立高通量筛选中药中ACEI的方法是发现新型降压 药物的重、难点。 本文就ACE的无载体固定化，固定化后ACE的活性调节及在中药 中筛选ACEI的应用等方面做了以下的研究： ． 较了ACE．CLEAs及游离ACE的酶学性质，包括最适酶促反应温度、 最适pH、‰、‰觚、温度稳定性及pH稳定性等。以酶活力回收率为 h、质量比为0．02％的戊二醛 (NH4)2S04溶液作为沉淀剂、沉淀时间0．5 作为交联剂、交联时问1 ％值表明ACE．CLEAs对底物的亲和力与游离酶几乎相当 集过程中加入牛血清蛋白(BSA)作为氨基保护剂，在交联时改用京 尼平作为交联剂，在聚集体制备完成后用甲胺进行“后处理，在酶 活测定过程中考察一价阴离子的影响。结果均表明ACE．CLEAs中残 余醛基量很少，对酶活影响较小。 (3)测定了15种中药煎煮液的指纹图谱，并基于第二章制备的 对筛选出来的8种具有吸附差异性的中药，分别测定了其对 ACE．CLEAs的抑制活性。探讨了吸附差异性和抑制活性之间的关系， 并与己报道的文献进行比较。为从中药中快速筛选出天然ACEI类降 压药物提供参考。 关键词：血管紧张素转化酶；固定化；交联酶聚集体；活性；抑制剂；筛选； 中药 ABSTRACT an rolein convertingenzyme(ACE)playsimportant Angiotensin blood canraiseblood regulatingsystems．ACE pressureby pressure well the I to II，as as angiotensin inactivating convertingangiotensin offreeACEis bradykinin．Thepurification vasodilatingnonapeptide andit showedlowmechanical and complicated stabilitypoor istoo we ACE more，commercialexpensive．So reproducibility．what’S oftenimmobilizeACEwith can the