DNA对L，D氨基酸的手性识别和拆分.pdf

摘要 目前应用于色谱手性拆分的材料众多，但开发新型的手性拆分选择剂仍是目前色谱科学研究 的一个方向。经济易得、性能稳定、适用范围广是新型手性选择剂必备的要求。生物材料由于其 本身具有手性结构而可能具有手性选择性，其中蛋白质已经作为固定相以及手性流动相添加剂而 广泛应用于手性拆分过程。本论文综合研究了脱氧核苷酸(DNA)作为一种天然手性物质应用于 手性选择剂的机理、性能以及初步的实际应用。实验主要包括： 实验观察了ctDNA与苯丙氨酸、酪氨酸以及色氨酸之间的作用机理。紫外光谱显示三种氨 基酸的红移都小于3．4ran，减色率都小于60％，这意味着ctDNA与三种氨基酸之间存在相互作 用；无论ct DNA 并不能有效地保护三种氨基酸免受[Fe(CN)。]+的荧光猝灭作用；而向ctDNA—EB加入足量的三种 DNA 氨基酸，ctDNA—EB的荧光强度降幅都低于10％，说明三种氨基酸并不能有力地竞争EB在ct 上的嵌插结合位点；圆二色实验证明ctDNA-=种氨基酸的圆二色光谱与单纯ctDNA的圆二色光 谱峰的位置没有明显改变，说明三种氨基酸并不能引起ctDNA的空间结构发生明显变化：粘度 实验显示ctDNA一三种氨基酸的粘度最多是单纯ctDNA粘度的l_16倍；三种氨基酸的荧光发射 光谱说明三种氨基酸与ctDNA结合常数只是103数量级，且L一氨基酸相对于D一氨基酸更优先与 ctDNA结合，所以最终认定ct DNA与三种氨基酸之间应该主要是沟区结合方式，而不主要是静 电结合或嵌插结台。 鉴于ct DNA上附着的水分子的量而引起ct DNA与苯丙氨酸相互作用的影响。其中甲醇可以通过减少ct DNA上的负电荷而引起ct DNA结构的收缩，而氯化钠以及CTAB所电离出来的阳离子可以中和ct DNA结构的收缩，这两种收缩都会减少ctDNA对于苯丙氨酸分子的结合；相反，SOS所电离出来 的阴离子可以形成对ctDNA的静电排斥而引起ctDNA结构的外翻，这种外翻会增加ctDNA对 于苯丙氨酸分子的结合。 由于ctDNA对L一氨基酸具有明显优势结合，实验研究了ctDNA在水中对L，D一苯丙氨酸、 L，D一酪氨酸以及L，D一色氨酸的手性拆分。透析实验结果证明ctDNA对L，D一苯丙氨酸、L，D一酪氨 酸以及L，沪色氨酸具有较强的手性拆分作用，表现为摄后的透析液表现明显的右旋特征。进一步 DNA对L，D一苯丙氨酸的结合，而 的实验证明甲醇溶液、氯化钠溶液以及CTAB溶液能够减弱ct DNA对 SDS溶液却能增强ctDNA对L，D一苯丙氨酸的结合。除此之外，四种添加剂均消弱了ct L，D一苯丙氨酸的手性选择性。 由于ctDNA溶液对L，D一氨基酸具有明显的手性识别以及拆分作用。以纤维素滤纸以及纤维 素粉作为ctDNA的载体材料，实验进一步尝试了将ctDNA键合到载体的可能。在合适的反应条 件下，ctDNA可以键合到载体材料上从而实现ctDNA的固载化，而这种固载化的ctDNA仍然对 L，D一氨基酸具有一定的手性拆分。 关键词：ctDNA，L，D-苯丙氨酸，L，D一酪氨酸，L，D一色氨酸，手性识别与拆分 Abstract have in Itiswellknownthat kindsofchiralselectorsbeen many