植物病毒的电镜诊断.pdfVIP

维普资讯 ④ 电子显微学报 V0l—l8，N0．3 l099年 6月 JournalofChineseElectronM icroscopySociety 1999—06 文章编号 ：i000—6281f1999)03—0274—289 植物病毒的电镜诊断 一 洪 健 陈集双 周雪平 李德葆 27 ff (1 甬 牺疆 雨 所．2生物科学系，杭州310029)J 厶 摘 要 ：末文舟 绍 了植精病毒新的分类和命名 系统，综述 1植物病毒 电镜诊断的常规枝木 以及各个 病毒属的形态学特 征。在 ICTV 柱告的 l1科、47属共 789种植帕病毒中，花椰菜花叶病毒属 、杆状 DNA 病毒属、番茄斑姜{再毒属、苜蓿花 叶病毒属、越生病毒科 、呼肠孤 病毒科 、弹状病毒科等七个具有 典型开j态特征 的属或科 ．以及螺旋对称结构 的杆状及线状病毒 ．通过负染色可作 出诊断 寄王细胞 的 摘理变化尤其内合体的 态结构也是诊断的重要依据．至少有^个属或科的成 员如花椰暮花 叶病毒 属、蝈草花叶病毒属、番茄丛接病毒科、马锌薯 Y病毒科等产生特异性的细胞内含体 这些特征为电 关键词：!!坚；兰—!堡：兰三兰丝 ／馔 lf 分类号 ：Q336；$432．41 文献标识码 ：A 自从 Kausche和 Melcher首次在 电镜下看到烟草花叶病毒 以来．电镜 已成 为植物病毒研究 必不可少的常规手段之一。运用负染色、超薄切片和免疫 电镜等多种技术 ，可 以很直观地显示病 毒粒子的形态结构、病毒在寄主细胞 内的存在状态、寄主细胞的结构变化、以及病毒的复制和装 配等过程 。Martelli、Kurstak、Edwardson、Christie、Lesemann等总结了当时已报道的各种植物 病毒的形态学和细胞病理学特征 ，认为通常情况下只要运用负染色和超薄切片电镜观察就能够 诊断和鉴别植物病毒，一般可诊断到组的水平，有些细胞病变特征还能用于区分不同的病毒种甚 至株系 一 。在Maramor~ch、Rubio—Huertos、Franchi的专著中展示的精美照片．为植物病毒的 电镜诊断提供了参照， 。尽管当今分子生物学技术的发展给我们提供了比电镜技术更灵敏、 简便的病毒诊断方法，但由于形态观察的直观性 ，电镜诊断仍有着重要的应用价值 。 植物病毒的分类与形态学诊断 植物病毒的分类系统多年来一直是以组 (group)为分类单元．在 1995年国际病毒分类委员 会 (ICTV)发表的第六次报告中一’“，首次采用与其它病毒相一致的科 (family)和属 (genus)的 分类系统，将 789种 已知植物病毒划归为 1个 目、l1个科、47个属。但 由于植物病毒本身所具有 的分类性状很有限，目前对病毒特性 的了解仍不够充分，多数分类单元还不完整，有的病毒只归 类到科 ，更多的情况是 22个属没有 目和科 ，只有属 的分类单元 ，还无法把植物病毒分类系统掏成 一 个系统发育分类树 (表 1)。 在植物病毒的形态鉴别和诊断中最有用的特征是病毒粒子的形态结构和寄主病变 。目前的 分类系统中，花椰菜花叶病毒属、杆状DNA病毒属、番茄斑萎病毒属 、苜蓿花叶病毒属、双生病 毒科、呼肠孤病毒科、弹状病毒科等七个属或科的病毒粒子具有特别典型的形态学特征．通过负 染色即可确认其归属。对于烟草花叶病毒、马铃薯Y病毒等螺旋对称的杆状及线状病毒．可以不 经提纯而直接用病组织粗汁液负染色观察 ．依据病毒粒子的大小和弯曲情况一般能判断到属或 科 。对于小的二十面体病毒，有些也可 以根据粒子外形进行初步判断 ，如圆而平滑的黄瓜花叶病 毒属、雀麦花叶病