三个水稻叶色突变体的鉴定和基因克隆.pdf

摘 要 sativa 突变体是功能基因组学研究的重要材料。以粳稻品种t(Or：rza 室构建了由20000多个独立转基因株系组成的T-DNA插入突变体库。从该突变 体库Tl代群体中寻找性状可见突变体，发现了三个叶绿素缺陷突变体：低温敏 感的叶色突变体，纪、缺叶绿素b突变体cbl和高温敏感叶色突变体cde∥。本论 文针对这三个突变体，开展了性状鉴定、遗传分析、基因克隆和初步的功能验证 的研究。主要结果如下： 1．舷突变体是低温敏感的叶绿素缺陷突变体，在限制性温度(230C或更低 温度)下，突变体叶片出现大面积白化的现象，色素含量测定显示，突变体叶绿 素和类胡萝b素含量明显低于野生型植株，然而生长在高温条件(32℃)下，该突 变体和野生型植株叶绿素含量差别不大；遗传分析表明该突变是单基因控制的隐 性突变。 2．PCR和潮霉素抗性分析显示突变体，配突变性状和T-DNA插入共分离； 通过TAIL．PCR获得了插入位点的旁邻序列，序列分析显示T-DNA插入到一个 H+．ATPase基因的第一个外显子上。构建了ffc基因的干涉载体，遗传转化后获 得了叶绿素缺陷