《miRNA Sponge介导的miR-17和miR-20a基因沉默的抗白血病作用机制.》.pdf

· 932 · 中国实验血液学杂志 JournalofExperimentalHematology2014；22(4)：932—937 文章编号 (ArticleID)：1009—2137【2014)04—0932—06 · 论 著 · miRNASponge介导的miR．17和 miR-20a基 因 沉默的抗 白血病作用机制 牛文艳，吴顺泉，徐珍珍，林君，战榕 福建省血液病研究所，福建省血液病学重点实验室，福建医科大学附属协和医院，福建福州 350001 摘要 本研究旨在检测急性白血病患者中miR．17和miR-20a前体的表达水平，并探讨miRNASponge介导的 n1iR一17和miR一20a沉默的抗 白血病作用机制。采用荧光实时定量PCR方法检测初治急性 白血病患者及 8种 白血 病细胞株中miR一17和miR一20a前体的表达水平，分析其在各型白血病中的表达情况。利用前期构建的针对miR一 17和miR一20a基因的miRNASponge慢病毒表达载体，感染高表达miR一17和miR一20a的Jurkat细胞株；用CCK一8 方法及流式细胞术分别检测miR．17和miR-2Oa沉默对Jurkat细胞增殖能力及细胞周期的影响。结果表明：初治急 性白血病患者中miR一17和miR一20a前体的表达明显高于正常对照(P0．05)；且与急性髓系白血病患者相比，急 性淋巴细胞 白血病患者中的表达量更高；然而二者表达量与患者外周血高白细胞计数无明显相关性(P0．05)。 miR-j7和miR-2Oa沉默能抑制Jurkat细胞的增殖，使细胞周期阻滞于G一s期，同时促进细胞的凋亡。结论 ：急性 白血病患者中miR一17和miR-20a呈过表达，可能参与白血病的发生、发展；高表达的miR一17和miR-2Oa可通过在 转录后抑制P21和E2F1表达，从而促进细胞增殖及细胞周期G．一s期转换，抑制细胞凋亡 。 关键词 miRNASponge；miR一17；miR一20a；基因沉默；抗 白血病机制 中图分类号 R733．7 文献标识码 A doi：10．7534／j．issn．1009—2137．2014．04．010 Anti．1eukemiaM echanism ofm ／R-／7andm ／R-20aSilencingM ediated bymiRNA Sponge NlUWen-Yan，wUShun·Quan。xUZhen—Zhen．LlNJun，ZHANRong F ianInstituteofHematology，FujJanProvincialKeyLaboratoryofHematology，FufianMedicalUniversityUnionHospital；Fuzhou 350001，FujianProvince，China CorrespondingAuthor：ZHANRong，SeniorPhysician，Professor，TutorofMasterPostgraduate．E-mail：deanzhanrong@yahoo．corn． cn Abstract Thisstudy wasaimedtoquantitativelydetecttheexpression levelsofpre-·miR-·17 nad pre--miR--20ain acuteleukemiapatientsnadeightkindsofleukemiacelllines．nadtoinvestigatethenati—leukemiamechnaism ofmiR—7 andmiR-20asilencemediatedbymiRNA Sponge．Qunatitativereal—timePCRwasusedtodetectthemRNA expression levelsofpre—miR一17nadpre—miR-20ainpatientswithvarioust