中药川芎指纹图谱的研究中山大学化学与化学工程学院.ppt

中药川芎指纹图谱的相似性研究 答辩人：叶润仪 指导老师：甘峰 副教授 报告内容 前言 实验内容 结果与讨论 一. 前言 国家自然科学基金资助课题 中山大学化学院的创新基金课题 中药指纹图谱意义 相似性计算方法 相似性计算方法 相似性计算方法 研究方案 川芎样品来自四川、广东和江西三个产地 采用超声萃取，HPLC-DAD联用得到样品中各成分色谱数据 三个产地各自平行测定10次（分两个样品两天完成），共建立30个指纹（每个指纹由15个共有峰的面积数据组成） 采用向量余弦系数，相关系数，PCA主成分分析综合评价指纹图谱之间的差异 二. 实验内容 样品制备 色谱条件 样品制备 2.0 实验内容 色谱条件 图 2 三产地平均指纹图谱 内在一致性评价 小结 30个指纹的PCA 投影图中看出，三个产地的指纹图谱存在显著的差异。 同一产地10 个指纹之间也存在差异（甚至可以把两个实验日所做的指纹区分开来）。 但是，无论是向量余弦法，相似系数法或PCA投影图分析，都难以为我们提供一个客观指标，评价这些差异究竟有多大。 谢谢大家 致谢 如我们所料，我们得到了30个产地的指纹图谱数据，如图所示这是各个产地10个色谱图叠加在一起，前面5个和后面5个分布是两天做出来，可以看出它们的重现性很好 RSD数据也证明了该方法重现性，从三个产地15个共有峰各自的RSD四川*是在相隔一星期后做的一个重现性的测试 运用化学计量学上的向量余弦法、相似系数法和主成分（PCA）投影法对它们进行相似性分析，程序自编。 向量是运用了两个向量X和Y在空间上余弦夹角计算获得的，如果向量完全相同，余弦夹角系数cos为1 相关系数跟我们也就是回归系数，如果两个向量是相同的，它的值也应该是1； 主成分分析应用一种降维的思想，把每个指纹图谱看作一个多维的向量， 用线性代数的数学方法计算出每个向量在第一第二主轴上的得分，再用其做 出PCA 图，图上每一个点代表一个指纹图谱，从PCA 点的分布状况，可以直 观地分辨出各个指纹之间的异同。但这个方法也有其不足之处，再本文中有所 讨论。 本文建立用液相HPLC方法建立了川芎指纹图谱，通过向量余弦、相关系数和主成分分析法，研究了三个产地的川芎样品间的差异。并探讨了在研究相似性方面这三个方法的不足。 大家好，我今天答辩的题目是“中药川芎指纹图谱的相似性研究” 我报告的内容分成三个部分，首先在前言部分,我为大家描述一下本研究的立题以及实验内容，最后是重点的结果与讨论 * * 课题简介 关键技术 向量余弦法 相似系数法 主成分（PCA）投影法 走向国际市场 中药质量控制 一个指纹: 指纹矩阵: 夹角余弦法 相关系数法 主成分分析（PCA）： 称取某一产地0.50g 川芎粉末（40目） 用甲醇定容至10.0m 容量瓶 35 ℃超声萃取18 min 溶液过0.20μm滤膜 直接进样 min 0 20 40 60 80 100 mAU 0 200 400 600 800 1000 min 0 20 40 60 80 100 mAU 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 min 0 20 40 60 80 100 mAU 0 200 400 600 800 1000 四川 广东 江西 图 1 三产地川芎各10个色谱图的叠加 % (n＝10) 1 2 四川 广东 江西 Tr/min Area 表 3 三地区向量余弦系数与相关系数 三. 结果与讨论 图 3 三个产地的川芎的PCA投影图 图 5 四川川芎10个指纹PCA投影图 图 6 江西川芎10个指纹PCA投影图 内在一致性评价 图 7 广东川芎10个指纹PCA投影图 内在一致性评价 表 4 四川川芎10个指纹图谱一对一比较的相关系数 本论文是在导师甘峰副教授的悉心指导下完成的。甘老师渊博的知识，活跃的科学思维，严谨的治学态度，诲人不倦的教学精神给我留下了深刻印象，给予我极大的启迪。恩师在治学、做人等各方面的谆谆教导和生活上的关心，使我终生受益。在此谨向甘老师致以诚挚的谢意！ 以四川，广东和江西三个产地的川芎为分析对象，参照文献运用高效液相色谱法对其进行分析，在同一实验条件下得到了30个（每产地10个）川芎指纹图谱：15个共有峰的保留时间-峰面积数据。 课题研究背景：指纹图谱的研究现状分析（中药在中国以及东南亚医学上的应用有几千年的传统，目前世界上有几十亿人在使用;但是, 如果在生产过程的没有标准化的质量控制，中药难以走向世界）中药指纹图谱研究的意义在于对中药过程中进行质量控制,而质量控制关键技术在于指纹图谱之间比较问题,目前广泛使用的比较方法有向量