海洋芽孢杆菌B-9987遗传转化系统及研究及次级代谢相关调控基因bmbll02初步功能及研究.pdf

海洋芽孢杆菌B．9987的遗传转化系统的研究及次级代谢调 控基因bmblI．02的功能研究 摘 要 海洋芽孢杆菌B．9987是从我国渤海潮间带植物盐地碱篷的根中分离得到 的。前期研究结果表明，其发酵液对于多种植物病原真菌(如稻瘟霉和茄交链孢) 都具有较强的抑制作用，暗示了B一9987具有产生丰富次级代谢产物的能力，为 了从分子水平上揭示B．9987其产生次级代谢产物的能力并对其生物合成的分子 调控机理进行研究，本课题着重于以下两部分的研究： 第一部分是海洋芽孢杆菌B．9987遗传转化系统的构建。 海洋芽孢杆菌B．9987为天然分离菌株，为了在其中进行遗传操作，首先要 建立一种有效的方法能够使得外源DNA导入B．9987之中，以自主方式复制， 或通过同源重组或位点特异性重组整合到染色体上随宿主一起复制。海洋芽孢杆 菌B．9987的遗传转化系统尚未有人研究。本论文主要对B．9987的原生质体形成、 再生及转化方法进行了较为系统的研究，初步建立了B．9987的原生质体．电击转 CFU／ggDNA。 第二部分是次级代谢调控基因bmbll02的功能研究。 通过生物信息学分析和比较基因组学分析发现，B．9987基因组中存在一个 超家族DNA结合区，该家族调控蛋白往往通过与靶基因结合，在转录水平上参 与调控多药efflux pumps或抗生素生物合成途径。因此，我们从B一9987基因组 功能进行了初步研究。 以上结果为开展海洋芽孢杆菌B一9987遗传转化及其次级代谢途径的分子调 控机理奠定了基础。 关键词 海洋芽孢杆菌B一9987遗传转化系统原生质体电转化次级代谢bmbll02调 控基因 Establishmentof forBacillusmarinusB一9987 geneticsystem and functionof bmbll02involvedin regulatorygene metabolism secondary Abstract BacillusmarinusB一9987was isolatedfromthe ofSuaedasalsa rhizosphere collectedintheintertidalzone ofBohaiofEasternChina．Thefermentationbroth Bay ofB．marinusB一9987exhibited inhibition suchas significantagainstplantpathogens andAlternariaso肠nibothinvitroandin Pyriculariaoryzae that vivo，suggesting B-9987has remarkable ofbioactive order producibility to the compounds，Instudy metabolismandtheir mechanismonmolecular sectio