庆大霉素对急性分离小鼠耳蜗螺旋神经节神经元细胞电生理特性影响.pdfVIP

论文 庆大9素对急性分离小鼠耳蜗螺旋神经节神经元细胞电生理特性的影响 庆大霉素对急性分离小鼠耳蜗螺旋神经节 神经元细胞电生理特性的影响 研究生:邓嘉虹 导 师:梁传余 教授 摘 要 目的:探讨庆大霉素对急性分离小鼠耳蜗螺旋神经节神经元 ((SGN) 细胞电生理特性的影响及其意义。方法:急性酶解分离小鼠耳蜗SGN细 胞，并利用间接免疫荧光细胞化学染色法对其进行鉴定。应用全细胞电 压钳技术对急性分离小鼠SGN胞膜上的钾、钠离子通道电生理活动进行 记录和分析，并研究庆大霉素对钾、钠离子通道电流的峰值的影响和与 细胞外液中庆大霉素浓度的关系，以及庆大霉素洗脱后电流的恢复倩况。 结果:在荧光显微镜下呈亮绿色的细胞为SGN细胞。在SGN细胞膜上 记录到对氯化四乙胺 (TEA-Cl)、4-氨基毗咙 (4-AP)敏感的外向延迟 整流钾电流和A型钾电流，以及对河豚毒素 (TTN)敏感的内向钠电流， 离子通道具有电压依赖性。庆大霉素能抑制电压依赖性钾通道，但不能 抑制电压依赖性钠通道，其钾通道抑制作用与细胞外液中庆大霉素的浓 度呈剂量依赖性，庆大霉素洗脱后电流恢复不完全。结论;急性酶解分 离的小鼠耳蜗SGN细胞膜上主要具有延迟整流钾通道、A型钾通道和钠 通道，其电生理特性为听觉传导机制的研究提供了重要的参考，并从电 生理的角度解释了庆大霉素通过抑制螺旋神经节神经元细胞的钾离子通 道而产生耳毒性的机制。 关键词:膜片钳技术 螺旋神经ri神经元 电生理学 庆大霉素 论文 庆大霉素对急性分离小鼠耳蜗螺旋神经节神经元细胞电生理特性的影响 Gentamicinsinfluenceonthe electrophysiologicalpropertiesofacutely dissociatedmurinecoclearspiralganglionneurons Postgraduate:DengJiahong Tutor:Prof.LiangChuanyu Abstract Objective:Toexploretheinfluenceofgentamicinonacutely dissociatedmurinecoclearspiralganglionneuronselectrophysiological propertiesanditssignificance. Method:Murinecoclearspiralganglionneurons(SGN) were dissociatedacutelyusingtrypsin.Indirectimmunocytochemicalidentification wasperformedandcellswereobservedunderfluorescentmicroscope. Potassiumandsodiumchannelcurrentsofacutelytrypsin-dissociatedspiral ganglionneuronswererecordedandanalyzed,usingwhole-cellvariationof thevoltageclamptechnique.Westudiedgentamicinsinfluenceonthepeak currentsofpotassiumandsodiumchannelsoncellmembranesofspiral ganglionneurons,andtherelationshiptogentamicinsconcentrationin extracellularfluid,andthecurrentsrecoveryaftergentamicinbeingwashed out. Results:Thelight-greencellsunderfluorescentmicroscopewere.spiral ganglionneurons.Inthemembranesofspiralganglionneurons,werecorded 论文 庆大霉素