洛沙坦对人单核细胞源树突状细胞免疫成熟的影响及机制的研究.pdfVIP

洛沙坦对人单核细胞源树突状细胞免疫成熟的影响及其机 制研究 中文摘要 第一部分氧化低密度脂蛋白和洛沙坦对树突状细胞免疫成熟的影响 目的：探讨血管紧张素II受体1(ATl)拮抗剂(AI出)类药物洛沙坦对由 氧化低密度脂蛋白(OxLDL)诱导的人单核细胞源树突状细胞(DCs)免疫成熟 进程的影响。 方法：采用密度梯度离心结合免疫磁珠法分离人外周血CDl4+单核细胞，经 含100ng／ml rhlL-4的RPMI-1640培养液培养5天，使其 rhGM．CSF和50ng／ml OxLDL干预24小时，以PBS作为阴性对照。采用流式细胞术检测细胞免疫表 和IFN．Y)的浓度。 结果：与PBS组相比，OxLDL干预呈浓度依赖性上调DCs表面共刺激分子 水平明显升高，也呈浓度依赖性。与浓度为5％g／ml的OxLDL干预组相比，1％M 减弱OxLDL诱导的DCs分泌细胞因子IL．10、IL．12和IFN．Y。 结论：OxLDL是DCs免疫成熟和功能活化的重要刺激因素，而ARB类药 物洛沙坦可抑制OxLDL诱导的DCs免疫成熟，这可能是其抗AS的一个重要机 制。 关键词：树突状细胞；动脉粥样硬化；氧化低密度脂蛋白；血管紧张素II受 体1拮抗剂 第二部分 血管紧张素II和洛沙坦对树突状细胞免疫成熟的影响 II)和洛沙坦对人单核细胞源DCs免疫成熟 目的：探讨血管紧张素II(Ang 进程的影响。 方法：采用密度梯度离心结合免疫磁珠法分离人外周血CDl4+单核细胞，经 rhlL一4的RPMI-1 含100ng／mlrhGM-CSF和50ng／ml 640培养液培养5天，使其 Ang II干预24小时，以PBS作为阴性对照。采用流式细胞术检测细胞免疫表型 和IFN．Y)的浓度。 II干预后DCs表达共刺激分子CD80和成熟度 结果：与PBS组相比，Ang 理可明显抑制Ang IL．12和IFN．Y的分泌。 II是DCs免疫成熟和功能活化的重要刺激因素，而ARB类药物 结论：Ang 一个重要机制。 关键词：树突状细胞；动脉粥样硬化；血管紧张素II；血管紧张素II受体1 拮抗剂 第三部分 洛沙坦对树突状细胞免疫成熟影响的机制研究 免疫成熟影响的机制。 6 方法：采用密度梯度离心结合免疫磁珠法分离人外周血CDl4+单核细胞，经 640培养液培养5天，使其 含l rhlL一4的RPMI-1 OOng／mlrhGM．CSF和50ng／ml 分化为未成熟DCs。根据干预因素的不同将细胞分为下列七组①10州ml OxLDL+10I．tM洛 OxLDL、(虿)501．tg／mlOxLDL、③100“g／mlOxLDL、(D50tig／ml 沙坦、⑤10nM II、⑦lOOnM AngII、⑥100nMAng AngII+10I．tM洛沙坦，干预 24小时后收集细胞，以PBS作为阴性对照。采用ELISA法检测上述①．④组细 PCR法和Western．blot法分别检 胞培养上清液中AngII的浓度，采用Real．time 测DCs清道夫受体SR-A、CD36和LOX。1的mRNA和蛋白的表达。 结果：与PBS组相比，不同浓度OxLDL干预可浓度依赖性促进DCs自分泌Ang II；与浓度为50I-tg／ml 分泌无明显影响。未经干预的DCs可表达少量的清道夫受体，OxLDL干预后呈浓 但SR．A和CD36的表达无明显变化。与PBS组相比，II干预也可浓度依赖性