蛇床子素对AD大鼠学习记忆影响及机制及研究.pdf

中文摘要 蛇床子素对AD大鼠学习记忆的影响及机制研究 摘 要 阿尔茨海默病(Alzheimer’S 的一种以进行性痴呆为特征的脑慢性退行性疾病，临床主要表现为记忆力 减退、智能障碍及行为情绪等的异常改变。统计表明，65岁左右的老年人 期预计可达到20年，但大多数病例在确诊后仅能存活8～10年，它已经成 为人类的第四号杀手。随着人口老龄化进程加快，开发对AD有效的干预 措施和治疗药物已成为AD研究的热点，也是一个倍受关注的社会问题。 AD的发病机制一般包括胆碱功能降低，氧化应激，淀粉样肽的级 联反应，炎症介质，甾体类激素减少。另外兴奋性毒性、细胞凋亡 氨基酸类神经递质与学习和记忆密切相关，Asp和Glu属于兴奋性氨基酸， Gly和GABA属于抑制性氨基酸，它们对维持神经系统的兴奋和抑制平衡 的平衡被破坏，是导致神经元损伤的关键因素。细胞凋亡是AD发生神经 元退行性死亡的重要途径，因此干扰细胞凋亡可能成为治疗AD新方法。 细胞凋亡受多种基因的调控，Bcl．2基因家族是很重要的调控基因，包括 众多成员，其中Bax在凋亡中起促进作用，Bcl．2则拮抗细胞凋亡。 凋亡被抑制。近年来，随着对细胞周期及其调控研究的深入，人们发现 AD发病机制与细胞周期调控密切相关，提出了AD发病机制细胞周期假 说：一旦细胞周期调控的某一环节出现异常，成年人中枢神经系统的神经 元可再次进入细胞周期，但处在有丝分裂末期企图重新进入细胞周期的神 经元将出现细胞周期停滞，最终形成AD某种病理特征或神经元凋亡。 7．甲氧基．8．异戊烯基．香豆素，传统中药蛇 蛇床子素(osthole，Ost)， 床子的组成成分，具有多种的药理作用，包括抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗 血小板、雌激素样和抗疼痛等作用，目前己在临床上用于治疗皮肤病和性 病多年。我们多年来一直从事蛇床子素改善学习记忆，抗衰老的研究，目 中文摘要 ACHE)活性、增强谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione 和超氧化物歧化酶(superoxide free (oxygen 作用小，能透过血脑屏障(blood．brain 疗AD的有效药物。 基于以上研究背景，本研究采用行为学实验和电生理学实验的方法， 研究蛇床子素对Ap25．35诱导AD大鼠认知障碍及中枢可塑性的影响；采用 柱前衍生化高效液相色谱紫外检测法研究蛇床子素对Ap25．35诱导的AD大 鼠海马中氨基酸类神经递质水平变化：采用HE染色、TUNEL染色、免疫 组织化学染色方法和流式细胞技术研究蛇床子素对Ap25．35诱导的AD大鼠 海马神经元凋亡、凋亡相关蛋白表达及细胞周期的影响。具体内容如下： 1 蛇床子素对AD大鼠学习记忆的影响 目的：采用一次性侧脑室注射聚集态Ap25-35建立AD大鼠模型，并以 不同剂量的蛇床子素进行干预，观察蛇床子素对AD模型大鼠认知障碍的 影响。 方法：SD大鼠随机分4组：生理盐水对照组(control group)，模型 l 组(model mg·kg。组(Ostgroup)，．蛇床子素 group)，蛇床子素12．5 2 1，模型组和蛇床子素组大鼠侧脑室注 25．0mg·kg。1坌H(Ostgroup)。实验d 射聚集态Ap25．35建立AD大鼠模型，对照组大鼠注射生理盐水。造模后对 照组和模型组大鼠腹腔注射(peritoneal 床子素组大鼠分别给予不同剂量蛇床子素，所有动物都连续给药14d。造 water 模后d10．d14进行Morris水迷宫(morrismaze，MWM)实验，大鼠训练 h(d5)，移走站台进行测试实验，记录大鼠在目标象限停留时间和穿过站 台位点的次数。 结果：随着训练天数的增加，各实验组潜伏期均不断缩短；d1各组