PDX1、NeuroD1及其MafA转导小鼠骨髓间充质干细胞及其小鼠iPS细胞制备胰岛素分泌细胞的实验的研究.pdfVIP

PDX-1、NeuroD1 及MafA 转导小鼠骨髓间充质干细胞及小鼠iPS 细胞制备胰岛素分泌细胞的实验研究 中文摘要 PDX-1、NeuroD1 及MafA 转导小鼠骨髓间充质干细胞及 小鼠iPS 细胞制备胰岛素分泌细胞的实验研究 中文摘要 目的 观察胰岛素转录关键调控基因PDX- 1、NeuroD1 及 MafA 转染小鼠 骨髓间充质干细胞(mBMSCs)和小鼠诱导多能干细胞(iPSCs)后，能否定向分化 为胰岛素分泌细胞，探索体外基因转染制备胰岛素分泌细胞用于移植治疗 1 型 糖尿病的可行性。 方法 (1) 全基因合成小鼠 PDX- 1、NeuroD1 及 MafA 基因 （以下简称三基因） 编码区域序列并测序。将目的基因片段分别与内部核糖体进入位点序列-绿色 荧光蛋白（IRES-GFP ）进行PCR 拼接，得到目的基因与 GFP 的共表达片断， 并将含目的基因序列的质粒重组到腺病毒载体上。分别将含目的基因PDX- 1、 NeuroD1 及 MafA 的腺病毒载体转染 293A 细胞，制备重组腺病毒 Ad-mPDX-1-IRES-GFP、Ad–mNeuroD