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第三章培养基(sunxianxun).ppt
作用:前体有助于提高产量和组份。 用法:前体使用时普遍采用流加的方法。 前体一般都有毒性,浓度过大对菌体的生长不利 苯乙酸,一般基础料中仅仅添加0.07% 前体相对价格较高,添加过多,容易引起挥发和氧化,流加也有利于提高前提的转化率。 3、产物促进剂 所谓产物促进剂是指那些非细胞生长所必须的营养物,又非前体,但加入后却能提高产量的添加剂。 促进剂提高产量的机制不完全清楚,其原因可能是多方面: 有些促进剂本身是酶的诱导物; 有些促进剂是表面活性剂,可改善细胞的透性,改善细胞与氧的接触从而促进酶的分泌与生产, 可能表面活性剂对酶的表面失活有保护作用; 有些促进剂的作用是沉淀或螯合有害的重金属离子。 抑制剂 在培养基中添加抑制剂会抑制某些代谢途径的进行,同时会使另一代谢途径活跃,从而获得人们所需要的某一终产物或使正常代谢的某一代谢中间产物积累起来。 五、水 发酵工厂,恒定的水源是至关重要的,因为在不同水源中存在的各种因素对微生物发酵代谢影响甚大。 水源质量的主要考虑参数包括pH值、溶解氧、可溶性固体、污染程度以及矿物质组成和含量。 对于常规发酵,可靠、持久,能提供大量成分一致清洁的水。 3.3 发酵培养基的设计和优化 首先是培养基成分的确定,再决定各组分之间的最佳配比。 一、培养基成分选择的原则 菌种的同化能力 代谢的阻遏和诱导 合适的C、N比 100∶0.2~2.0 pH的要求 只有小分子能够通过细胞膜进入细胞内进行代谢。 微生物能够利用复杂的大分子物质是由于微生物能够分泌各种各样的水解酶类,在体外将大分子水解为能够直接利用的小分子物质。 由于微生物来源和种类的不同,所能分泌的水解酶系不一样。 菌种的同化能力 根据微生物的营养特性和培养基的目的,速效氮源和迟效氮源的相互配合,发挥各自的优势,避其所短。 葡萄糖效应、分解代谢物阻遏影响。 微生物利用氮源的能力与菌种、菌龄的不同有差异。 代谢的阻遏和诱导 氮源过多,使菌体生长过于旺盛,pH偏高,不利于代谢产物的积累;氮源不足,则菌体繁殖少,影响产量。 碳源多则容易形成较低的pH, 碳源不足则容易引起菌体的衰老和自溶; 碳氮比不当会引起菌体按比例的吸收营养物质,从而直接影响菌体的生长和产物的合成。 合适的C、N比 100∶0.2~2.0 微生物在不同的生长阶段,其对碳氮比的最适要求不一样。 碳源作为做碳架参与菌体和产物的合成又作为生命过程中的能源,所以比例要求比氮源高。 一般工业发酵培养的碳氮比为100:(0.2~2.0)。 在氨基酸发酵中因为产物含氮量较多,所以氮源比例就相对高些。 微生物在利用营养物质后,由于酸碱物质的积累或代谢酸碱物质的形成造成培养体系pH的波动; 发酵过程中调节pH的方式一般不主张直接用酸碱来调节,因为培养基波动常常是由于某些营养成分的过多(或过少)而造成的。 要保证发酵过程pH能满足工艺的要求,合理配制培养基是成功的决定因素。 配制培养基选取营养成分时,要考虑其代谢后对培养体系pH缓冲体系的贡献,保证整个发酵过程能够处于较为适宜的状态。 pH的要求 ③确定各成分最适的浓度(设计合理的实验方法)。 二、培养基设计的步骤 ① 初步确定可能的培养基成分; ② 通过单因子实验确定出最适宜的培养基成分; (一)理论转化率与实际转化率 理论转化率:指理想状态下根据微生物的代谢途径进行物料衡算,所得出的转化率的大小。 实际转化率:指实际发酵过程中转化率的大小。 如何使实际转化率接近于理论转化是发酵控制的一个目标 。 三、成分含量的确定 转化率:单位质量的原料所产生的产物的产量。 例: 如在酒精生产中葡萄糖转化为酒精的理论转化率计算如下: 葡萄糖转化为酒精的代谢总反应衡算式为∶ C6H12O6 ─→ 2C2H5OH + 2CO2 葡萄糖转化为酒精的理论得率为∶ 2*46 Y = ─── = 0.57 162 发酵培养基 * * 3 微生物培养基 3.1 培养基的类型及功能 3.2 发酵培养基的成分及来源 3.3 培养基的设计及优化 常用培养基的基本条件 培养基: 用于维持微生物生长和产物形成的营养物质。 一般培养基要求: ①必须含有合成细胞组成所必需的原料; ②满足一般生化反应的基本条件; ③一定pH条件; 3.1 培养基的类型及功能 一、按纯度 合成培养基: 原料其化学成分明确、稳定 适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律 培养基营养单一,价格较高,不适合用于大规模工业生产
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