课用柠檬酸谷氨酸发酵机制.pptVIP

总结 在食品工业上的应用。甘氨酸、丙氨酸具有甜味，天冬氨酸、谷氨酸具有酸味，谷氨酸钠、天冬氨酸钠具有鲜味，可用作食品添加剂。蛋氨酸、赖氨酸、谷氨酸钠、甘氨酸、丙氨酸和苏氨酸目前作为饲料添加剂。 在医药工业上的应用。氨基酸的混合液可供病人注射用，氨基酸的混合粉剂可作宇航员、飞行员的补品。精氨酸药物用于治疗由氨中毒造成的肝昏迷；丝氨酸药物用作疲劳回复剂；蛋氨酸、胱氨酸用于治疗脂肪肝；L－谷氨酸与L－谷氨酰胺用于治疗脑出血后的记忆力障碍等。 在化妆品生产中的应用。氨基酸及其衍生物与皮肤的成分相似，具有调节皮肤pH和保护皮肤的功能。胱氨酸用于护发素中，丝氨酸用于面霜中。谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸与脂肪酸形成的表面活性剂，具有清洗、抗菌等功能，用于护肤品、洗发剂。 在农业上的应用。一些氨基酸在体外并无杀菌功能，但能干扰植物与病原菌之间的生化关系，使植物的代谢及抗病能力发生变化，从而达到抑菌的目的。苯丙氨酸和丙氨酸可用于治疗苹果疮痂病。用甘氨酸制成了除草剂，易被微生物分解，不会造成环境污染。 二、氨基酸的发酵生产 氨基酸本身的合成在不同生物体中，有较大的差异，然而许多氨基酸的合成途径在不同生物体中也有共同之处。 按照起始物可将氨基酸的合成分成几个家族： ㈠谷氨酸族（α-酮戊二酸族） 包括：谷氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、赖氨酸和脯氨酸； ㈡丙酮酸族 包括：丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸； ㈢天冬氨酸族（草酰乙酸族） 包括：天冬氨酸、天冬酰胺、苏氨酸和异亮氨酸； ㈣磷酸甘油酸族 包括：甘氨酸、丝氨酸和半胱氨酸； ㈤芳香族 包括：苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸； ㈥组氨酸 合成为单独的一条途径。 部分氨基酸及其生产所用菌株 谷氨酸产生菌因环境条件变化而引起的发酵转换 早期生产谷氨酸的方法有两种，一是提取法：甜菜厂付产物糖蜜中含有焦谷氨酸，用强碱处理可得到谷氨酸；二是蛋白质水解法：将面筋加酸水解，再分离提纯。 1957年发酵法生产谷氨酸在日本协和发酵公司投产。 通过代谢调控发酵谷氨酸生产菌能够在体外积累菌体最大生长需要量300多倍的谷氨酸 谷氨酸发酵的代谢途径 1、丙酮酸的生成 葡萄糖首先经EMP和HMP两个途径生成丙酮酸，其中以EMP途径为主，生物素充足时HMP所占比例为38%，控制生物素亚适量、发酵产酸期，EMP所占的比例更大，而HMP所占比例约为26%。 2、丙酮酸的去向 一部分在丙酮酸脱氢酶系的作用下氧化脱羧生成乙酰CoA； 另一部分经CO2固定反应生成草酰乙酸或苹果酸； 反应式： PEP+CO2+GDP 草酰乙酸+GTP PYR+CO2+ATP 草酰乙酸+ADP+Pi PYR+CO2+NADP+H+ 苹果酸+NADP+ 3、α－酮戊二酸的生成 草酰乙酸与乙酰COA在柠檬酸合成酶催化作用下，缩合生成棕檬酸，进入TCA循环，柠檬酸在顺乌头酸酶作用下生成异柠檬酸，再在异棕檬酸脱氢酶作用下生成α－酮戊二酸。 α－酮戊二酸是谷氨酸合成的直接前体。 4、谷氨酸的生成 α－酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶作用下经还原氨基化反应生成谷氨酸。 α－酮戊二酸+NADPH+H++NH4+ 谷氨+H2O+NADP+ （二）控制谷氨酸生物合成的重要措施（重点） 有三个重要环节可控制谷氨酸的大量生成，也是谷氨酸产生菌所必须具备的主要生化特点： 1、 α－酮戊二酸氧化能力弱，即α－酮戊二酸脱氢酶活力微弱 谷氨酸产生菌糖代谢的一个重要特征即为α－酮戊二酸氧化能力微弱，谷氨酸产生菌的α－酮戊二酸氧化能力微弱，尤其在生物素缺乏条件下，TCA循环到达α－酮戊二酸时，代谢会受到阻挡，把糖代谢阻止在α－酮戊二酸处，对导向谷氨酸形成具有重要意义。 2、谷氨酸脱氢酶活性强 谷氨酸产生菌的谷氨酸脱氢酶活性都很强，此酶以NADP+为专一性辅酶，在谷氨酸的生成合成中，必须有谷氨酸脱氢酶和异棕檬酸脱氢酶的共轭作用。 由于谷氨酸产生菌的谷氨酸脱氢酶比其它微生物强大得多，因此由TCA循环所得的柠檬酸的氧化中间物就不再往下氧化，而是以谷氨酸的形式积累起来。 3、细胞膜对谷氨酸的通透性高 谷氨酸的分泌可降低细胞内产物的浓度，消除了谷氨酸转化成其它代谢物的可能，并减低对谷氨酸脱氢酶的抑制，从而使谷氨酸的生成途径畅通。 由生物素亚适量可造成细胞膜对产物的通透性，生物素改变细胞膜通透性的机制与影响细胞膜磷脂的含量与成分有关。 措施： 可通过添加表面活性剂、高级饱和脂肪酸或青霉素等控制细胞膜对谷氨酸的通透性。 还可通过选育温度敏感突变株、油酸缺陷型或甘油缺陷型等突变株也可控制对细胞膜对谷氨酸的通透性。 （三）乙醛酸循环的作用（重点） 由于TCA循环的缺陷（α－酮戊二酸脱氢酶活力微弱），为了获得能量和产生生物合成反应所需要的中间产物，在谷氨酸发酵的菌体生长期，需要异