选修土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.pptVIP

课题背景 1.尿素 一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。 一、分离的原理：选择培养基 1.概念： 选择培养基指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 练习 应用选择培养基的主要原理是（ ） A.使所需要的微生物大量繁殖 B.显现某微生物的特征，以区别于其他微生物 C.抑制不需要的微生物生长 D.适宜野生型微生物生长 二、菌落计数 活菌计数——稀释涂布平板法 实验设计 实验设计流程图 实验注意事项 1.土壤取样 从肥沃、湿润的土壤中取样，先铲去3cm左右的表层土，在将样品装入事先准备好的信封中，并且取土用的铁铲和盛土用的信封都需要提前灭菌。 样品稀释 在火焰旁称取土壤10g，加入盛有90ml的无菌水锥形瓶中，充分摇匀，制成101 倍土壤稀释液。在去出1ml土壤稀释液注入到盛有9ml无菌水试管中，依次制成102，103，104，105，106 倍的土壤稀释液。 实验步骤 5.培养观察 将涂布好的培养皿放在30~37℃下培养2d，每隔24h与牛肉膏蛋白胨培养基进行一次比较，并做好记录。 课题延伸 本实验只是完成了初步筛选，还需进一步鉴定 鉴别培养基：在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌落的培养基。 二、菌落计数 菌落计数常用方法 活菌计数法——稀释涂布平板法 显微镜直接计数法——血细胞计数板 滤膜法——伊红美蓝培养基（水中 大肠杆菌） 5．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。 （1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了__ __和___ ___。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是__ ___和__ ____。 （2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_____ __。 （3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于____ __中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种___ ___作为对照进行实验。 （4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_____种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。 （5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_______细菌，这种培养基被称为___ _。 由NordriDesign?提供 LOGO Page ? * 本作品采用知识共享署名-非商业性使用 2.5 中国大陆许可协议进行许可。 专业交流 模板超市 设计服务 本作品的提供是以适用知识共享组织的公共许可（ 简称“CCPL” 或 “许可”） 条款为前提的。本作品受著作权法以及其他相关法律的保护。对本作品的使用不得超越本许可授权的范围。 如您行使本许可授予的使用本作品的权利，就表明您接受并同意遵守本许可的条款。在您接受这些条款和规定的前提下，许可人授予您本许可所包括的权利。 查看全部… NordriDesign?中国专业PowerPoint媒体设计与开发 专题2 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 2.细菌利用尿素的原因 土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶 CO(NH2)2 脲酶 + CO2 NH3 +H2O 1.从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 2.统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 课题目的 启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的 要求，到相应的环境中去寻找。 原因：因为热泉温度70～800C，淘汰了绝大多 数微生物只有Taq细菌被筛选出来。 耐高温（930C）的DNA聚合酶。 筛选菌株的实例 美国黄石国家公园的热泉 2.原理： 根据不同微生物的特殊营养要求或对其他化学或物理因素的抗性不同而制备培养基。在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中寻找。 C 2.用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是（ ) A.未接种的选择培养基 B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C.接种的牛肉膏蛋白胨培养基 D.接种了的选择培养基 C 15.0g 琼脂 1.0g 尿素 10.0g 葡萄糖 0.2g MgSO4`7H2O 2.1g NaH2PO4 1.4g KH2PO4 土壤中分解尿素的细菌的分离所需培养基： ①从物理性质看此培养基属于哪类？ ②在此培养基中哪些作为碳源