冲击波对体外诱导培养的破骨细胞形成及其骨吸收作用的影响.pdf

．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1 ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4 骨吸收作用的影响 ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8 …………………………．．8 …………………………13 …………………………16 附表………………………………………………………………………．．23 讨论……………………………………………………………………………………………．25 参考文献……………………………………………………………………30 综述……………………………………………………………………………………………………33 个人简历………………………………………………………………………．45 中文摘要 冲击波对体外诱导培养的破骨细胞形成及骨吸收作用的影响 摘 要 衡导致骨骼脆弱，并增加了骨折风险为特征的疾病。骨质疏松症与破骨细 单核／巨噬细胞系，由破骨细胞前体的融合而来，形成多核巨细胞，是人 体生理性骨重建和病理性骨破坏过程中高度特异性的唯一具有骨质吸收 功能的多核巨细胞。骨吸收作用是通过破骨细胞的活动完成的，因此，破 骨细胞在骨骼的形成和骨量的调节方面起着关键作用。病理条件下，许多 骨代谢性疾病(如骨质疏松症)，都是由于骨吸收亢进引起的。因此，对破 骨细胞的形成和骨吸收作用的研究在治疗骨质疏松等骨吸收疾病中具有 重要的指导意义。 ShockWave 体外冲击波疗法(Extracorporeal 年来发展起来的一种由体外震波碎石术衍生来的物理治疗方法，二十世纪 90年代初发现冲击波可以治疗骨科的很多疾病．实验研究发现适宜能量的 冲击波可以增加成骨细胞的成骨活性，进而促进骨折愈合。但冲击波作为 一种能量刺激形式，对破骨细胞的形成及骨吸收活性的影响，目前未见国 内外有相关研究。 本实验通过将体外冲击波作用于体外诱导培养的破骨细胞，探讨冲击 波对破骨细胞形成及骨吸收作用的影响。 方法：1．骨髓间充质干细胞的分离及诱导培养 密度梯度离心法体外分离骨质疏松症患者骨髓基质干细胞，接种在放 为2组，冲击波干预组和空白对照组。 2．冲击波对体外诱导培养的破骨细胞形成的影响 00次的冲 冲击波干预组在体外诱导培养的第4天给予0．08mJ／mm2，1 击波作用。两组分别在体外诱导培养的第3，6，9，12天，提取破骨细胞， 进行TRAP染色，进行破骨细胞形态观察，进行破骨样细胞和破骨细胞计 中文摘要 和C—Fos的基因表达的差异，分析冲击波对体外诱导培养的破骨细胞形成 的影响。 3．体外冲击波对成熟破骨细胞骨吸收作用的影响 冲击波作用。在体外诱导培养的第15天取出骨片，l％甲苯胺蓝染色后光 镜下进行骨陷窝计数，扫描电镜观察破骨细胞形成的骨吸收陷窝，用 Imageproplus5．0计算机图像分析系统分析吸收陷窝的面积，反映破骨细 胞的骨吸收活性。 4．各实验分别重复3．5次，实验数据用x士s表示，所有参数采用SPSS 11．0统计软件进行分析。不同时间点冲击波干预组和空白对照组均数比较 采用