遗传工程简介ppt.pptVIP

通过细胞融合（cell fusion）即细胞杂交（cell hybridization）来探索遗传变化或通过细胞器的转移来研究其功能。 ②染色体工程（chromosomal engineering） 即分离提取某一染色体或某一段染色体，然后将其转移至另一细胞来分析其遗传效应。 ③基因工程（genetic engineering） 是建立在分子遗传学理论基础之上，以控制性状遗传的基因为操作对象，按着预先的构想，在严格控制条件下完成基因转移，达到改造遗传性目的的过程。 综上，所谓遗传工程，即根据遗传学的原理，采用类似工程设计的方法，对生物遗传物质进行有计划的技术操作，从而达到定向改造生物遗传组成，使其获得新的遗传性状，这一过程称为遗传工程。 *一、细胞工程 细胞工程主要技术和研究领域包括： (一)、细胞、原生质体植株再生 (二)、植物原生质体作为基因工程的受体 (三)、细胞、原生质体融合p75 （四）细胞核移植 （五）细胞器移植 一、动物细胞培养的环境要求 1、温度2、pH3、溶氧及气体环境4、渗透压 二、动物细胞的营养需求 1、天然培养基 ·其优点是营养成分丰富、培养效果好；缺点是成分复杂、个体差异大、来源有限。· 天然培养基的种类主要包括生物性体液（如血清）、组织浸出液（如胚胎浸出液）、凝固剂（如血浆）、水解乳蛋白等。 二、动物细胞的营养需求 2、合成培养基 ·合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质对细胞体内生存环境中已知物质在体外人工条件的模拟，经过反复试验筛选、强化和重新组合后形成的培养基。· 合成培养基的优点：既能给细胞提供一个近似于体内的生存环境，又便于控制和提供标准化体外生存环境。· 合成培养基的主要成分：氨基酸、维生素、糖类、无机离子和其它辅助成分。 三、动物细胞工程的主要技术及其实践意义 （一）单克隆抗体技术在现代医学中的应用 （二）胚胎移植和核移植技术在畜牧业中的应用 （三）动物细胞大量培养生产次生产物 （四）动物克隆技术的应用潜力 *二、染色体工程 染色体工程是物种间遗传转移的最传统的方式，也是目前广泛进入生产应用的遗传工程。利用染色体替换来改变生物遗传特性，如利用染色体的易位、缺体、三体等方法，获得新的染色体组合。p77 (四)、 染色体工程中的现代技术 基因决定性状（一） 青霉菌能产生对人类有用的抗生素——青霉素 基因决定性状（二） 豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮 基因决定性状（三） 家蚕能够吐出蚕丝为人类利用 定向基因改造设想 基因工程简介 在各种酶的作用下，将目的基因的DNA分子与载体DNA分子相连接，形成重组的DNA分子，以一定的方式导入原无该类分子的宿主细胞，并使宿主生物变为自然界原来没有并能连续传代的新生物。 基因工程简介 要点： 供体、载体、受体 基因工程分狭义（上游）：重组、克隆、表达的设计和构建。 广义（下游）：表达工程菌的发酵培养和产物的纯化。 目的：DNA扩增，外源基因表达产物，表达调控，改造生物遗传特性等。 基因工程概念p78 基因工程：在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出所需要的基因产物。 基因工程过程示意图 基因工程操作的工具 将目的基因片断从人体细胞内提取， 需要基因的剪刀——限制性内切酶。 将目的基因与运载体DNA连接， 需要基因的针线——DNA连接酶。 将目的基因运入大肠杆菌， 需要基因的运输工具——运载体。 限制性内切酶 分布：主要在微生物中。 特点：特异性，即识别特定核苷酸序列， 切割特定切点。 结果：产生黏性未端（碱基互补配对）。 举例：大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 限制性内切酶作用过程 DNA连接酶 连接酶的作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 连接的部位：磷酸二酯键，不是氢键。 DNA连接酶的作用过程 运载体p79 作用：将外源基因送入受体细胞。 条件： 能在宿主细胞内复制并稳定地保存。 具有多个限制酶切点。 具有某些标记基因 种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。 质 粒 目的基因与质粒的连接 基因操作的基本步骤 提取目的基因 将需要的基因从供体生物的细胞内提取出来。 提取目的基因的方法（一）p79 直接分离基因——鸟枪法 提取目的基因的方法（二） 人工基因合成法 　（一）基因的分离 　　　各种生物中所含的基因很多。例如，最简单的DNA病毒也有近几十年基因，原核细胞有几千个基因，真核细胞则有上万个基因。这些不同的基因，在化学结构上都是由4种核苷酸组成，它们间性质极为相似，这样增加了基因分离