专题细胞工程.pptVIP

问题探究： 1、为什么已分化的植物组织或细胞能培养成完整植物体？ 植物组织培养的培养基 无机营养成分：C，H，O大量元素及部分微量元素 有机营养成分 ①含N物质：包括维生素和氨基酸 ②碳源：2%—5%的蔗糖（维持渗透压） 琼脂：起支持作用 相关激素：生长素，细胞分裂素和赤霉素 PH值：5.0－6.0 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。P36 反馈练习 1.下列属于组织培养的是（ ） A.花粉培养成单倍体植株 B.芽发育成枝条 C.根尖分生区发育成成熟区 D.未受精的卵发育成雄蜂 2.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的（ ） A.消毒灭菌 B.适宜的温度 C.充足的光照 D.适宜的养料和激素 3.要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，不需要（ ） A.具有完整细胞核的细胞 B.离体状态 C.导入外源基因 D.一定的营养物质和激素 1．两个来自不同植物的体细胞杂交的障碍是什么？ 2．有没有一种温和的去壁方法呢？ 3．为什么两个原生质体能发生融合，这与细胞膜的什么特性有关？ 4．如何让两个来源不同的原生质体发生融合？诱导方法有哪些？ 5.两个细胞融合的标志是？ 6．如何将杂种细胞培育成杂种植株？ 将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合在一起，形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能在体外大量增殖，又能持续分泌成分单一的特定抗体。 单克隆抗体的制备过程 1、动物特异性免疫 2、分离B淋巴细胞（B）；找到骨髓瘤细胞（G）。注意B淋巴细胞是一个系列。（B1,B2,B3,---Bn） 3、细胞融合——三种融合方式:（BB;BG;GG） 4、第一次筛选：在“选择培养基培养”上培养筛选杂交瘤细胞（只有BG杂交瘤细胞存活。但BG杂交瘤细胞也是一个系列：如B1G,B2G---BnG。而BB,GG在此培养基上不能存活。） 5、第二次筛选：在“多孔培养板上”培养杂交瘤细胞系列 ，每孔只有一个杂交瘤细胞。“克隆化培养”每个杂交瘤细胞，并进行“单一抗体检测”，“检测阳性”的孔内即是所需要的杂交瘤细胞。 6、选择所需要的杂交瘤克隆细胞群，体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 7、提取单克隆抗体。 1、作为诊断试剂：用于人类疾病及动植物病害的诊断和病原体鉴定,具有准确、高效、简易、快速特点。如同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形等。 2、用于治疗疾病和运载药物：主要用于癌症治疗。 生物导弹：抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，以单克隆抗体为导向，准确找到癌细胞位置，原位杀死癌细胞。 3、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A.②④ B.①③⑤ C.①②③④ D.②③ 练一练：请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的字母按正确顺序连接起来。 单克隆抗体的主要优点： 特异性强，灵敏度高，可大量制备。 单克隆抗体的应用 培养器皿 动物细胞培养瓶内表面 为什么要光滑、无毒？ （1）生产生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （2）获得基因工程中常用的受体细胞。 （3）用于检测有毒物质，判断物质毒性。 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据。 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体或组织 培养结果 获得细胞 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 植物激素、琼脂 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 动物细胞特点？ 分化潜能变窄：随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，分化潜能变窄，这是指整体细胞而言。 细胞核仍具有全能性：细胞核，它含有保持物种遗传性所需的全套基因，而且并没有因细胞分化而丢失基因，因此高度分化细胞的细胞核仍具有全能性。 根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达? 利用动物体细胞核移植技术 动物核移植的概念： 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 原