《LC-1 ScFv偶联GFP基因的构建及表达 Construction and expression of fusion gene of LC-1 ScFv and GFP》.pdfVIP

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2015-12-08 发布于河南
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《LC-1 ScFv偶联GFP基因的构建及表达 Construction and expression of fusion gene of LC-1 ScFv and GFP》.pdf

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《LC-1 ScFv偶联GFP基因的构建及表达 Construction and expression of fusion gene of LC-1 ScFv and GFP》.pdf

第39卷第5期浙江大学学报(工学版) VolI39NO．5 ournalof 2005 2005年5月 J ZhejiangUniversity(EngineeringScience) May LC一1 ScFv偶联GFP基因的构建及表达龚兴国，于红，徐飞虎，谭皓思 (浙江大学生命科学学院，生物大分子与酶工程研究所，浙江杭州310027) 摘要：从具有高效蛋白表达及活力的抗肺癌杂交瘤单克隆细胞株(LC一1)抽提总RNA，反转录成cDNA．根据肿瘤重链基因与修饰后的轻链基因连接为单链抗体基因．改造后的ScFv与绿色荧光蛋白(GFP)基因连接，构建表达质粒 nm激光激发显示绿色荧行SDS电泳分析其纯度．酶联免疫检测(ELISA)表明该蛋白已具有抗体活性．395 光，表明目的基因在原核生物中存在表达．关键词：绿色荧光蛋白；单链抗体；原核表达系统中图分类号：Q7 文献标识码：A 文章编号：1008—973X(2005)05—0751—05 Constructionand offusionofLC一1ScFvandGFP expressiongene GONG Fei—hu，TANHao—si Xing—guo，YUHong，XU ([nstitute Macromoleculeand Science， ofBiologic EnzymaticEngineering，CollegeofLife 310027，China) University，Hangzhou Z^ejiang cell has volumeand Abstract：TotalRNAof cancer line(LC—1)，whichsecretory anti—lung hybridoma high isolatedandtransferredinto tothe of chainfibromavirus activity，was cDNA．Accordinggenesingle variable of chain(VH)andchain(VL)werecloned (ScFv)。theregionsheavy light through 7 wasformedthe ofVHandmodifiedVL chain using reaction(PCR)，respectively．ScFvgene by ligation fusedwithGFP thefusioninto PCR，and