《农杆菌介导的甘蓝型油菜下胚轴遗传再生体系研究 Studies on Agrobacterium-mediated Hypocotyle Regenerative System in Brassica napus》.pdfVIP

ofAnhui 责任编辑石金友责任校对况玲玲 安徽农业科学，Journal A画．Sci．2013，41 31 ：12257—12261 农杆菌介导的甘蓝型油菜下胚轴遗传再生体系研究 朱小彬，于一帆，葛会敏，梁建生，陈云4 扬州大学生物科学与技术学院，江苏扬州225009 摘要[目的]研究农杆菌介导的甘蓝型油菜下胚轴遗传再生体系。[方法]以甘蓝型油菜为试验材料，以组织培养为基础，以下胚轴为 外植体，以统计出愈率和出苗率为指标，探讨农杆茵介导的遗传再生苗形成的影响因素。以G蛋白信号转导调节蛋白 RGS 为例，建立 稳定的甘蓝型油菜下胚轴遗传再生体系。[结果]种子经10％NaCIO灭菌20mim后播种，基底用1／2MS配琼脂，直径6cm的培养罐50 粒，光照充足 200 过程中各种因素对再生苗形成的影响，建立了有效的下胚轴遗传再生体系。 关键词甘蓝型油菜；组织培养；下胚轴；再生苗 中图分类号S188文献标识码A 文章编号0517—66ll 2013 31—12257—05 on inBrassica Studies napils Agrobacter／um-mediatedHypocotyleRegenerativeSystem ZItUXiao-binet ofBioscienceand Biotechnology，Vangzhou 225009 al Colege University，Yangzhou，Jiangsu inBrasswa Brasswaas hypocotyleregenerativesystem napus．[Method]Withnapus Abstract[Objective]TostudyAgrobacterium—mediated cultureas 88 inductionrateand rateas factorsof testmatefial，tissue indexes，t le basis。hypocotyleexplant，callUS emergence influencing werediscussed．Wi血theinterferedofthe ofG regulatorsprotein Agrobacterium—mediatedgeneticregenerationseedlings gene signaling RGS after10％NaCIO for stable inBr∞swa sterilization20 example，tlle system 1RTtpll$Wasestablished．[Result]Sowing proteins as regenerative mixedwith as 6cmculturetank interference min。1／2MS agarbasement，diameter 50，adequateillumination 200pmoVm2·s ，RGSiposi— a8 on tivestrainswas ofvariousfactors were regenerative successfullyobtained．[Conclusion]Withhypoeotyleexplants，effects seedlings Was studiedintissuecultureofBrassica effective established． napus，the hypocotyleregenerativesystem Brassica words Key napus；Tissueculture；Hypocotyle；Regenerativeseedling 油菜 Brasswa 讨论农杆菌介导的油菜下胚轴遗传转化过程中的可能问题 napus 是仅次于大豆的第2大植物油脂 来源，我国为世界油菜主产国，占据世界重要地位，面积、产 以及通过相应的单因子试验对比来优化转化过程，以期为完 量均居世界第一。专家们长期努力的目标集中在油菜的育 善油菜兼具稳定性和可重复性的良好遗传再生体系提供一 种和品种改良方面，常规的方法是有性杂交，但是存在着选育 些参考和方向，并为运用基因工程技术改良油菜奠定基础。 年限过长、远缘杂交不亲和和亲本材料匮乏等一系列问题。后 1材料与方法 来生物技术不断发展，直接将外源基因导人油菜来改变其生物 1．1材料 性状的方法已成为现今油菜育种和品种改良的热点。 1．1．1研究对象。甘蓝型油菜“扬油6号”，由扬州里下河 目前，油菜转基因的方法主要有：农杆菌介导法¨“1、 研究所提供。 1．1．2主要试剂。头孢霉素 Cefotaxime，sodiumsalt，Cef 、 PEG法p引、电击