DAPT阻断Notch信号通路对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226增殖和凋亡影响.pdf

1 万方数据 目录 目录………………………………………………………………………………(2) 中文摘要…………………………………………………………………………(3) 英文摘要…………………………………………………………………………(4) 引 言…………………………………………………………………………(6) 材料和方法………………………………………………………………………(8) 结 果…………………………………………………………………………(18) 讨 论…………………………………………………………………………(25) 总 结…………………………………………………………………………(31) 结 论…………………………………………………………………………(31) 参考文献…………………………………………………………………………(32) 致 谢…………………………………………………………………………(35) 综 述…………………………………………………………………………(36) 2 万方数据 DAPT 阻断 Notch 信号通路对人多发性骨髓瘤细胞系 RPMI8226 增殖和凋亡的影响 中文摘要 目的: 探讨γ-分泌酶抑制剂 DAPT 阻断 Notch 信号通路对高表达 Notch 的人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226 增殖和凋亡的作用及其机制。 方法：用不同浓度 （0.25、0.5、1.0、5.0、10.0 μmol ／L）DAPT 处理RPMI8226 细胞，用 Cell Counting Kit-8 法检测DAPT 处理细胞的增殖情况，用流式细胞 仪检测各组细胞的周期分布情况和凋亡；用Westen b lot 检测 RPMI8226 细胞 中Notch 受体胞内区(NICD)、Notch 下游基因Hes1 、抗凋亡蛋白Bcl-2 和凋亡 蛋白Bax 这四种蛋白的表达水平，用Quantity One 软件行半定量分析，用SPSS 统计软件进行数据处理及分析。 结果：1、DAPT 处理RPMI8226 细胞24 、48 、72 h 后，细胞生长增殖明显抑 制 （同对照组相比，P0.05) 。随着 DAPT 浓度的增大其抑制效果明显增强， 且作用时间随之延长，呈显著的时间- 效应、剂量- 效应关系；DAPT 作用 RPMI8226 细胞48 小时后，细胞被阻滞在G /G 期，凋亡率随DAPT 浓度的上 0 1 升，逐渐增加，(P0.05)。 2 、随着 DAPT 浓度的增高，Notch 信号通路中上游的启动基因 Notchl 和下游的靶基因Hes1 蛋白表达逐渐减弱，而凋亡蛋白Bax 表达明显上调，抗 凋亡蛋白Bcl-2 表达明显下调。P0.05 ，有统计学意义。 结论：1. DAPT 能抑制体外培养的人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226 增殖，使 细胞阻滞于G /G 期，这种抑制作用在一定范围内具有剂量依赖性。2. DAPT 0 1 能诱导体外培养的多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226 凋亡。3 ．DAPT 对RPMI8226